[发明专利]一种分离泮托拉唑和泰托拉唑药物消旋体的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种分离药物的方法，特别是涉及一种分离泮托拉唑和泰托拉唑药物消旋体的方法。

背景技术

泮托拉唑和泰妥拉唑是一类抗溃疡药物，主要用于治疗十二指肠溃疡、胃溃疡、反流性食管炎等与胃酸分泌相关的疾病。由图1，图2可知泮托拉唑和泰妥拉唑是分子结构相似，以硫原子为手性中心的手性药物，存在R，S两个对映异构体。对于大部分具有立体选择性的药物来说，消旋体给药相当于两种药物同时给药，或者说药物杂质含量50%，因此，抗溃疡药物单一对映体的研究开发成为热点。由于两个对映体具有相似的理化性质，常规的方法很难分离。目前对此类药物手性分离分析方法已经报道的有手性固定相高效液相色谱法和流动相添加剂高效液相色谱法。毛细管电泳法( Capillalry Electrophoresis, CE ) 是20世纪80年代发展起来的一项高效的分离分析新技术。它以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道，根据各组分之间的浓度和分配行为的差异而实现分离。它以高效、快速、简便著称，而且分离模式多、样品和试剂消耗量少、环境污染小、成本低，最重要的是优化分离时可以灵活改变选择剂的种类和浓度，因此已经越来越广泛的应用于手性分离。

手性配体交换色谱法( chiral ligand-exchange chromatography, CLEC )，即在色谱系统中引入某种金属离子和某种手性配位体，与待测对映体可形成两个非对映的三元配合物，经色谱过程实现光学异构体的立体选择性分离。该方法既不需要手性固定相也不需要柱前衍生化，在流动相中添加量极小，而且手性选择剂种类多样，所以该方法方便、快捷、成本低。目前，国内外没有采用手性配体交换毛细管电泳法分离此类手性化合物的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分离泮托拉唑和泰托拉唑药物消旋体的方法，该方法采用CLEC，以Cu(Ⅱ)，L-组氨酸为手性选择剂，分离分析两个抗溃疡药物消旋体，用于此类抗溃疡手性药物的体内分析和产品光学纯度检测，为此类手性药物的研究开发提供技术支持和保障。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种分离泮托拉唑和泰托拉唑药物消旋体的方法 ，该方法以Cu（Ⅱ）和L-组氨酸作手性选择剂，磷酸氢二钠为背景电解液，运用配体交换毛细管电泳法，使Cu（Ⅱ）、L-组氨酸和拉唑药物形成三元配合物，然后通过毛细管电泳仪使消旋体实现分离，其运用配体交换毛细管电泳法分离两个拉唑类药物消旋体，所用的手性选择剂是Cu（Ⅱ）和L-组氨酸；

其具体分离步骤如下：

a.样品和运行缓冲液的配置：样品储备溶液的配置，分别精密称取泮托拉唑和泰妥拉唑样品粉末10 mg，置10 mL棕色容量瓶中，以甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，得各样品浓度均为1 mg/mL的储备液，-20 ^oC冰箱保存；样品供试溶液的配制，精密量取各样品储备液1 mL分别至10 mL棕色容量瓶中，以甲醇定容至刻度，摇匀，得100 μg/mL供试液，4 ^oC冰箱保存；运行缓冲液1的配制，依次称取磷酸二氢钠、醋酸铜和L-组氨酸0.0195 g、0.040 g、0.0620 g置于50 mL烧杯，加25 mL二次蒸馏水溶解，用0.1 mol/L氢氧化钠溶液和10%磷酸调至pH 5.0，即得运行缓冲液，经0.45 μm微孔滤膜过滤后备用；运行缓冲液2的配制，依次称取磷酸二氢钠、醋酸铜和L-组氨酸0.0195 g、0.060 g、0.0932 g置于50 mL烧杯，加25 mL二次蒸馏水溶解，用0.1 mol/L氢氧化钠溶液和10%磷酸调至pH 5.0，即得运行缓冲液，经0.45 μm微孔滤膜过滤后备用。

b.仪器准备：分离过程在石英毛细管中进行，选取内径50 μm的毛细管，截取一段长度53 cm，在距端口8 cm处除去毛细管的聚酰亚胺层得到检测窗口，新的毛细管在使用前需冲洗和活化，连续分析时，每次分析前依次用依次0.1 mol/LNaOH、二次蒸馏水和运行缓冲液各冲洗10 min；

c. 设置分离条件：泮托拉唑：分离电压10 kV，检测波长 290 nm；泰妥拉唑：分离电压10 kV，检测波长 306 nm；

d. 进样： 进样高度10 cm，进样时间10 s，正极进样负极检测，进样间用运行缓冲液冲柱5 min，然后进行下一次进样。

所述的一种分离泮托拉唑和泰托拉唑药物消旋体的方法，其所述分离拉唑类药物消旋体的样品操作：运行缓冲液和样品均经0.45 μm微孔滤膜过滤，并超声脱气，样品用甲醇溶解，4℃冰箱保存备用。