[发明专利]与猪生长速度相关的遗传标记及其应用无效
申请号: | 201210157267.2 | 申请日: | 2012-05-18 |
公开(公告)号: | CN102649958A | 公开(公告)日: | 2012-08-29 |
发明(设计)人: | 张浩;陶著;李庆岗;吴克亮;史利华 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/68;A01K67/027 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞;王加岭 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生长 速度 相关 遗传 标记 及其 应用 | ||
1.一种与猪生长速度相关的遗传标记,其特征在于,其位于猪GHSR1α基因5′侧翼区上,它的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其中,151bp处的碱基C与猪快速生长性状相关,如果该碱基C突变为A,则与猪慢速生长性状相关。
2.用于检测权利要求1所述与猪生长速度相关的遗传标记的引物,其特征在于,包括正向引物F5′-AAACGCACTAATAAATGCTTCA-3′和反向引物R5′-CTTCCTGCCCTCACCTTTT-3′。
3.权利要求1所述与猪生长速度相关的遗传标记在鉴定猪种中的应用,其包括步骤:
1)提取待测猪的基因组DNA;
2)以待测猪的基因组DNA为模版,利用权利要求2所述引物F和R,通过PCR反应扩增出猪GHSR1α基因5′侧翼区177bp片段;
3)检测PCR扩增产物,如果扩增产物序列中151bp处的碱基为C,则待测猪属于生长速度快的猪品种,如果扩增产物序列中151bp处的碱基为A,则待测猪属于生长速度慢的猪品种。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,步骤2)中PCR反应使用的扩增体系以25μl计为:100ng/μl模板DNA 1μl,5pmol/μl引物F和R各1μl,10mmol/L dNTP mix2.0μl,5U/μL Taq DNA聚合酶0.5μl,10×PCR反应缓冲液2.5μl,余量为水。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,步骤2)中PCR反应使用的条件为:95℃5分钟;95℃30秒,58℃30秒,72℃20秒,36个循环;72℃7分钟。
6.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,步骤3)中检测PCR扩增产物采用RFLP法,具体为:用内切酶Acc II对PCR扩增产物进行酶切,并对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳检测,如果检测结果仅为一条带,则待测猪属于生长速度慢的猪品种,检测结果出现两条带,则待测猪属于生长速度快的猪品种。
7.含有权利要求2所述引物的用于检测猪生长速度的试剂盒。
8.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg2+、PCR反应缓冲液中的一种或多种。
9.根据权利要求7或8所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括标准阳性模板。
10.权利要求1所述与猪生长速度相关的遗传标记在猪分子标记辅助育种中的应用。
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