[发明专利]一种猪溶素突变体,其制备方法及用途

权利要求书

1.一种猪溶素突变体，其特征在于C端的353位点进行点突变，原来的脯氨酸突变为亮氨酸或缬氨酸，该突变体的氨基酸序列分别如序列表中序列1或3所示。

2.一种完全丧失溶血活性的猪溶素突变体，其特征在于C端的353位点由脯氨酸突变为缬氨酸，该突变体的氨基酸序列分别如序列表中序列3所示。

3.根据权利要求1所述的猪溶素突变体，其特征在于核苷酸序列分别如序列表中序列2或4所示。

4.一种包含权利要求1或2所述猪溶素突变体编码核苷酸序列的质粒，其特征在于该质粒为原核或真核表达质粒。

5.根据权利要求3所述质粒，其中质粒为pET28a-sly(P353L)或pET28a-sly(P353V)。

6.一种包含权利要求3或4所述质粒的菌株，其特征在于该菌株为大肠杆菌。

7.根据权要求5所述菌株，其特征在于该菌株为大肠杆菌BL21(DE3)。

8.权利要求1或2所述猪溶素突变体的制备方法，包括如下步骤：

(1)克隆猪溶素突变体基因，其C端的353位点进行点突变，原来的脯氨酸突变为亮氨酸或缬氨酸；

(2)构建猪溶素突变体质粒；

(3)将上述猪溶素突变体质粒转化表达菌株；

(4)猪溶素突变体的表达、纯化。

9.权利要求1或2所述的猪溶素突变体在制备猪链球菌疫苗的用途。

10.根据权利要求8所述用途，其中所述疫苗为重组蛋白疫苗。