[发明专利]一种固相制备戈舍瑞林的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种多肽药物的制备方法，尤其涉及一种固相制备戈舍瑞林的制备方法。 

背景技术

前列腺癌在欧美是男性癌死亡的主要原因之一。发病率随年龄增长，前列腺癌发病有明显的地区和种族差异，据统计中国人最低，欧洲人最高，非洲和以色列居间，我国及日本等国家为前列腺癌低发地区，因此有人认为东方人癌细胞生长比西方人缓慢，临床病例较少。另外前列腺癌与环境亦有关系。乳腺癌是人类最常见的一种恶性肿瘤,各国因地理环境、生活习惯的不同，乳腺癌的发病率有很大差异。北美和北欧大多数国家是女性乳腺癌的高发区，南美和南欧一些国家为中等，而亚洲、拉丁美洲和非洲的大部分地区为低发区。在北美、两欧等发达国家，女性乳腺癌的发病率居女性恶性肿瘤发病率的首位。乳腺癌在我国各地区的发病率也不相同，在世界上我国虽属女性乳腺癌的低发国。但近年来乳腺癌的发病率明显增高。尤其沪、京、津及沿海地区是我国乳腺癌的高发地区。 

常用的肿瘤药物主要是化学药物，但其化疗反应副作用大，所以寻找一种高效、低度的生物药物是大势所趋，目前临床效果较好的是促性腺释放激素类似物(LHRH-a)。戈舍瑞林优点是副作用少，无心血管并发症。 

 戈舍瑞林分子式为：Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(tBu)-Leu-Arg-Pro-Azagly-NH₂。 

 戈舍瑞林及其类似物的制备方法主要是液相合成工艺，操作复杂，反应步骤多，纯化方法繁琐，不利于工业生产，应用价值不高，例如：美国药物化学杂志J. Med. Chem 121（10），1018-1024,1978采用的是4+6片断缩合法，首 先 采 用 液 相 合 成 法 合 成 保 护 六肽Z-Tyr-(Bzl)-D-Ser-Arg(NO₂)-Pro-AzaGly-NH₂，合成出四肽 pGlu-His-Trp-Ser-OMe。将合成出来的四肽片段和六肽片段再次采用叠氮物法合成出戈舍瑞林。虽然在前面短肽的合成中解决了精氨酸保护的问题，但是在脱除六肽保护时将酪氨酸侧链酚羟基和精氨酸侧链胍基上的保护基也脱除掉，在最后一步接肽时会产生大量副产物，而且副产物性质相差不大，很难分离。 

     US4024248采用3+7片断缩合法。该路线中，首先，液相合成保护三肽pGlu-His-Trp-OMe。再合成七 肽 Z-Ser-Tyr-D-Ser(But)-Leu-Arg-Pro-AzaGly-NH₂，分别将三肽片段 pGlu-His-Trp-OMe 肼解，七肽片段除Z 保护基后，采用叠氮法将三肽片段和七肽片段缩合，即得到戈舍瑞林。这种方法分段少，七肽逐步缩合产率很低，并且精氨酸侧链胍基未保护，导致每步缩合出现副产物，每步分离纯化很困难。 

     波兰专利PL194997报道了一种5+5片断缩合法，首 先 采 用 液 相 合 成 法， 分 别 合 成 出 二 肽 片 段 Z-Ser-Tyr-OMe 和Z-Pro-AzaGly-NH₂， 然 后 分 别 采 用 碳 链 逐 步 增 长 法 合 成 出 五 肽 片 段pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-OMe 和 D-Ser(But)-Leu-Arg- Pro-AzaGly-NH₂，最后将两个五肽片段采用叠氮物法合成出十肽目标化合物戈舍瑞林。由于氨基酸均未进行侧链保护，这样会导致在接下来的缩合过程中均会产生副产物，导致纯化困难。 

  US2010311946A1采用的是2-CTC树脂或者Merrifield树脂，需固液结合法合成戈舍瑞林，并且最后要用到剧毒的试剂KOCN，对环境和药物造成风险；另外，Fmoc-Osu和水合肼合成Fmoc-NH-NH₂，实验发现Fmoc-NH-NH₂ 在DMF很难溶解，对固相合成造成很大困难。 

发明内容

为了克服上述液相合成技术的缺陷，如反应周期长、副产物多、难以分离、不利于放大生产等等，本发明提供了一种高收率、低成本、反应条件温和、环境污染小、有利于实现产业化的戈舍瑞林的固相制备工艺。 

为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：一种制备戈舍瑞林的方法，其特征在于： 

1) 由N，N -二琥珀酰亚胺碳酸酯和替代度范围为0.2-1.2mmol/g的酸敏感性氨基树脂在有机弱碱性催化剂下偶联；

2)用水合肼与步骤1）所得树脂反应得到Azagly-Resin；