[发明专利]一种辽东楤木高产皂苷愈伤组织的培养方法

权利要求书

1.一种辽东楤木高产皂苷愈伤组织的培养方法，其特征在于辽东楤木愈伤组织的培养方法是按以下步骤进行：一、采集辽东楤木的叶片，用水冲洗30~40min后，再用质量百分比浓度为70%的乙醇溶液浸泡消毒10s，然后用质量百分含量为0.1%HgCl₂浸泡消毒8min，最后用无菌水冲洗4~6次，再用无菌滤纸吸干叶片上的水分，将叶片切割成1×1cm²的正方形，接入到MS培养基中；二、将步骤一的MS培养基放置于黑暗条件下培养10~15d，培养温度为22℃~26℃，然后移至12h/d的光照条件下培养15~20d，培养温度为22℃~26℃，光照强度为2000~2500lx，长出愈伤组织；三、将愈伤组织转接到1/2MS培养基中，在12h/d光照条件下培养30d，培养温度为22℃~26℃，光照强度为2000~2500lx；四、按步骤三的处理方法继代培养愈伤组织3~6次，即完成辽东楤木高产皂苷愈伤组织的培养。

2.根据权利要求1所述的一种辽东楤木高产皂苷愈伤组织的培养方法，其特征在于步骤一中采集的叶片为5月中旬～6月中旬的生长20～25d的新生叶片。

3.根据权利要求1或2所述的一种辽东楤木高产皂苷愈伤组织的培养方法，其特征在于步骤一中的MS培养基包含有1.0mg/L2,4-D、质量浓度3%蔗糖和6.5g/L琼脂。

4.根据权利要求3所述的一种辽东楤木高产皂苷愈伤组织的培养方法，其特征在于步骤二中将接种的培养基放置于黑暗条件下培养13d。

5.根据权利要求4所述的一种辽东楤木高产皂苷愈伤组织的培养方法，其特征在于步骤二中将培养基移至12h/d光照条件下培养17d。

6.根据权利要求5所述的一种辽东楤木高产皂苷愈伤组织的培养方法，其特征在于步骤二和步骤三中的光照强度为2300lx。

7.根据权利要求6所述的一种辽东楤木高产皂苷愈伤组织的培养方法，其特征在于步骤三中的1/2MS培养基是包含有0.5mg/L NAA+0.3～0.5mg/L 6-BA、质量浓度3%蔗糖和6.5g/L琼脂。

8.根据权利要求7所述的一种辽东楤木高产皂苷愈伤组织的培养方法，其特征在于步骤四中所述的按步骤三的处理方法4~5次继代培养愈伤组织。