[发明专利]一种检测喹噁啉-2-羧酸的检测试剂盒及其方法

权利要求书

1.一种检测喹噁啉-2-羧酸的时间分辨荧光免疫分析法试剂盒，其特征在于：由多孔包被板，缓冲液，喹噁啉-2-羧酸标准，喹噁啉-2-羧酸的抗体冻干品，铕标记的羊抗鼠抗体，洗涤液和增强液所组成。

2.一种根据权利要求1所述检测喹噁啉-2-羧酸的时间分辨荧光免疫分析法试剂盒的检测方法，包括免疫原、包被原和单克隆抗体的制备以及样品前处理，其特征在于：

（1）将喹噁啉-2-羧酸与牛血清白蛋白偶联，得到免疫原；

（2）将喹噁啉-2-羧酸与卵清蛋白偶联，得到包被原；

（3）用步骤（1）的免疫原免疫原免疫小鼠，通过杂交瘤技术，得到分泌抗QCA的单克隆抗体的杂交瘤细胞株；

（4）以体内诱生腹水法大量制备抗体，使用Protein G柱进行纯化，获得抗QCA的单克隆抗体IgG；

（5）用步骤（2）的包被原包被固相载体；

（6）将动物组织先经过酸解提取后，再过MAX柱净化，最后加入衍生试剂和催化剂进行处理，得到待测产物；

（7）将步骤（6）的待检物进行测量荧光强度cps，对照标准曲线计算样品中的喹噁啉-2-羧酸含量。

3.根据权利要求1所述检测喹噁啉-2-羧酸的时间分辨荧光免疫分析法试剂盒的检测方法，其特征在于：所述的固相载体是多孔包被板，采用48或者96孔的多微孔包被板作为固相载体。

4.根据权利要求1所述检测喹噁啉-2-羧酸的时间分辨荧光免疫分析法试剂盒的检测方法，其特征在于：所述的衍生试剂是丁胺。

5.根据权利要求1所述检测喹噁啉-2-羧酸的时间分辨荧光免疫分析法试剂盒的检测方法，其特征在于：所述的催化剂剂是腈基磷酸二乙酯。

6.根据权利要求1所述检测喹噁啉-2-羧酸的时间分辨荧光免疫分析法试剂盒的检测方法，其特征在于：所述步骤（6）和（7）具体为取包被有QCA-OVA的微孔包被板，加入50μl的QCA-ABA或处理好的样品到各自的微孔中，加50μl以缓冲液稀释的喹噁啉-2-羧酸抗体，25℃~37℃振荡0.5~1小时，洗涤液洗三次，加以缓冲液稀释的100μl Eu³⁺-羊抗鼠抗体，25℃~37℃振荡0.5~1小时，用洗涤液洗六次，加200μl增强液振荡5分钟后测量荧光强度cps，从标准曲线计算样品中的喹噁啉-2-羧酸含量。