[发明专利]利用重组过氧化物酶A4-Prx脱毒玉米酒糟生产饲料的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种生产饲料的方法，具体涉及一种利用重组过氧化物酶A4-Prx脱毒玉米酒糟中ZEA毒素生产饲料的方法。

背景技术

饲料和食品霉变是全世界普遍存在的问题，据联合国粮农组织（FAO）2002年资料，全世界每年约有25%的农作物粮食被霉菌毒素污染，而我国平均每年由于霉变所引起的饲料损失占总产量的10%以上，最主要的霉变来源于镰刀菌产生的一种雌激素类真菌毒素——玉米赤霉烯酮（ZEA）。

ZEA性质稳定难降解，玉米及其副产品极易受ZEA污染。王金荣等对玉米DDGS（酒糟蛋白饲料）多个样品调查结果显示，ZEA的阳性检出率均为100%，ZEA含量范围为4.79~1219.90μg/kg，超出国家标准（玉米中ZEA含量≤60μg/kg）5～20倍以上，其对DDGS为饲料的禽畜危害深远（王金荣，马鹏，黄亚宽，等.2010年上半年DDGS常规养分含量差异及霉菌毒素污染状况调查[J].饲料工业,2011,32(17):61-64.）。

生物转化脱毒ZEA技术能避免物理和化学方法的去毒效果有限、营养物质损失大、成本高和有害物质残留等缺点，已成为研究热点和主要趋势。日本Takahashi-Ando等人对粉红粘帚霉（Clonostachys rosea）的研究较为全面，分离出的内酯水解酶zhd101可破坏ZEA结构，使其转化为雌激素毒性较弱的化合物，且ZEA的降解率在80%~90%之间（Kimara M,Naoko T,Nishiu-chi T.MolecularBiology and Biotechnology for Reduction of Fusarium Mycotoxin Contamination.Pesticide Biochemistry and Physiology,2006,86(3):117-123.）。大肠杆菌和酿酒酵母表达的重组zhd101表现出了内酯水解酶的能力，对ZEA的降解率可达75%，具有zhd101的转基因玉米也具备降解ZEA的能力（Tomoko I,Naoko T,Noriyuki O,et al.Reduced contamination by the fusarium mycotoxin zearalenone in maizekernels through genetic modification with a detoxification gene.Applied andEnvironmental Microbiology,2007,73(5):1622-1629.）。

此外，奥地利Molnar从白蚁后肠中分离出了一种新酵母菌—毛孢子菌属Trichosporon mycotoxinivorans，它的培养物能将ZEA降解为二氧化碳和其它弱紫外吸收的代谢物，从而降低其毒性（Molnar O,Schatzmayr G,Fuchs E，et al.Trichosporon mycotoxinivorans sp.nov.,a new yeast species useful in biologicaldetoxification of various mycotoxins.Systematic and Applied Microbiology,2004,27:661-671.）。

Abdullah从玉米地里分离的假单胞菌ZEA-1可利用ZEA为唯一碳源，并且在12h内可将ZEA减少一半，编码此ZEA降解酶的基因在大肠杆菌中也获得了活性表达（Abdulla D.Altalhi,Bahig El-Deeb.Localization of zearalenone detoxificationgene(s)in pZEA-1 plasmid of Pseudomonas putida ZEA-1 and expressed inEscherichia coli.J Hazard Mater,2009,161:1166-1172.）。

中国发明专利CN99101577.0公开了一种菜籽饼发酵脱毒新方法，将菜籽饼同发酵剂（淀粉类副产品或三七糠或玉米粉或麸皮等）按一定比例搅拌均匀，在常温20℃以上，置于发酵池（防漏防渗）内加水，水面溢出料面5厘米左右，发酵脱毒，从而得到优质饲料。