[发明专利]三单孢交杂选育白色金针菇的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种食用菌的杂交育种方法，具体涉及一种三单孢交杂选育白色金针菇的方法，属于微生物育种领域。

背景技术

常见的金针菇育种方法包括自然育种、诱变育种、杂交育种和利用生物工程(细胞融合和基因重组)育种。

自然育种是最古老、最简单、应用最广的选种方法。它是先收集和分离各地的有关菌株,然后通过生产试验比较各菌株的生产性能,选留理想菌株。

    诱变育种是用物理或化学诱变因素诱发遗传物质(DNA)发生变异,从中选出具有优良性状的菌株的方法。诱变育种一般方法简单、周期短,且一次能获得大量突变菌株。

    杂交育种是一种遗传物质在细胞水平上的重组过程。因为金针菇能产生有性孢子,所以能通过有性杂交育种,从而获得具双亲优良性状的新品种。杂交育种中通常通过单核菌丝配对的方式产生新的子代,也有单核与双核菌丝配对的。杂交后得到的杂合异核菌丝体要经过是否具有双核菌丝体或具锁状联合菌丝体来鉴定。这种杂交称为单孢杂交。杂交育种可以把两亲本的优良性状组合于子代中，也可以把亲本中控制同一性状的不同微效基因积累于同一杂种个体中获得超亲性状。从近年来育种工作的现状来看，杂交育种仍是食用菌中应用最广，效果最显著的重要手段。杂交育种中能否获得高产优质的优良菌株，其成败的关键之一在于杂交亲本的选择，作物育种实践表明，亲缘关系远的亲本杂交，获得优良杂交品种的可能性大。以往在亲本的选择方面，主要是根据农艺性状，如菌丝生长速度、出菇天数、菌柄直径、菌柄长度、菌盖直径、菌盖厚度、每瓶菇数、每瓶菇重及商品菇所占比重等；近几年，也有应用分子标记如RAPD技术测定金针菇菌株间的遗传距离，并据此选择亲本，预测杂种优势。

金针菇的黄色对白色是显性的，因此要获得白色金针菇只能用白色金针菇品种作亲本，才可能获得白色金针菇杂交种，而本发明是通过三个亲本的单孢杂交（三单孢杂交）获得白色金针菇的一种育种方法，此方法可以从高产的黄色金针菇的品种出发，再与两个白色金针菇亲本的单孢杂交，获得白色金针菇杂交种的方法。杂交后代同时具有黄色品种和白色品种的高产等特性，杂交菇体是白色，为培育白色金针菇品种提供一种新的杂交途径，具有理论意义和实际应用价值。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种三单孢杂交选育白色金针菇的方法，为金针菇的杂交育种提供一种新的杂交途径。所述三单孢杂交选育白色金针菇的方法，指通过金针菇三个亲本的单孢杂交，获得性状优良的白色金针菇杂交种的育种方法。

本发明的三单孢杂交选育白色金针菇的方法，包括亲本选择、单孢分离、第一轮杂交与筛选、杂交子代F1的鉴定、第二轮杂交与筛选、杂交子代F2的鉴定，其特征在于步骤如下：

（1）亲本选择： 在农艺性状优良的金针菇不同品种的菌株中，用分子标记技术通过测定亲缘关系的方法，选择亲缘关系较远的3个菌株，分别作为杂交亲本；所述3个菌株设定为A菌株、B菌株和C菌株，A菌株为黄色金针菇菌株、B菌株和C菌株为不同品种的白金针菇菌株；

（2）单孢分离：分别对A、B、C  3个菌株进行单孢分离，测定各单孢菌株的交配型；

（3）第一轮杂交与筛选：将A菌株的单孢与B菌株的不同交配型单孢杂交，筛选出高产优质的杂交子代F1； 

（4）杂交子代F1鉴定：用分子标记技术验证F1是A菌株与B菌株的杂交后代；

（5）第二轮杂交与筛选：将F1的单孢与C菌株的单孢杂交，筛选高产优质的杂交种后代F2；

（6）杂交种F2鉴定：采用分子标记技术检测F2同时具有F1菌株和C 菌株的遗传物质，证实F2是F1和C菌株的杂交后代。

（7）栽培中试与筛选：将杂种F2进行中试栽培，筛选产量高，农艺性状稳定，并且商品性状好且稳定的菌株，即为用白色金针菇三单孢杂交育种方法选育的优良菌株。

本发明具有以下优点：获取白色金针菇的杂交种，传统的方法只能用白色金针菇品种作亲本，才可能获得白色金针菇杂交种；而白色金针菇作为杂交亲本，通常的结果是产量较低，农艺性状不理想。而采用黄色金针菇跟白色金针菇杂交，其杂种后代又通常为黄色金针菇，很难获得白色金针菇。本发明通过三个亲本的单孢杂交（三单孢杂交）的方法，以一个黄色金针菇和二个白色金针菇为亲本，其杂交后代为白色金针菇，而且遗传了亲本黄色金针的高产、早熟等优良性状，具有产量高，农艺性状稳定，并且商品性状好等优点，是白色金针菇杂交育种的一种好方法。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步的阐述。