[发明专利]一种利用胡萝卜愈伤组织培养水稻干尖线虫的方法

权利要求书

1.一种利用胡萝卜愈伤组织培养水稻干尖线虫的方法，其特征在于步骤如下：

（1）制备胡萝卜愈伤组织：新鲜胡萝卜洗净，用工业酒精浸泡后灼烧，至胡萝卜表皮变成暗红色，削去表皮，切成片放入灭菌培养皿中，封口，放入培养箱培养至长出胡萝卜愈伤组织；

（2）线虫的消毒和接种：水稻干尖线虫用硫酸链霉素溶液消毒，然后离心，沉淀用无菌水混匀继续离心，最后沉淀用无菌水稀释分散滴在胡萝卜愈伤组织上；

（3）线虫的培养繁殖和保存：将接种了水稻干尖线虫的胡萝卜愈伤组织放入黑暗培养箱内，在25℃~30℃培养或20℃~25℃保存。

2.根据权利要求1所述利用胡萝卜愈伤组织培养水稻干尖线虫的方法，其特征在于还包括线虫继代培养的步骤，是用无菌水清洗保存线虫的培养皿中的线虫，再重复步骤（2）和（3）的操作。

3.根据权利要求1所述利用胡萝卜愈伤组织培养水稻干尖线虫的方法，其特征在于步骤（1）中工业酒精浸泡时间为2min。

4.根据权利要求1所述利用胡萝卜愈伤组织培养水稻干尖线虫的方法，其特征在于步骤（1）中培养箱内的培养温度为25℃，黑暗培养。

5.根据权利要求1所述利用胡萝卜愈伤组织培养水稻干尖线虫的方法，其特征在于步骤（2）所述硫酸链霉素的消毒浓度为0.2wt.%，消毒时间3h以上。

6.根据权利要求1所述利用胡萝卜愈伤组织培养水稻干尖线虫的方法，其特征在于步骤（2）离心条件为4000rpm下2min。