[发明专利]人卵透明带蛋白-4的表位最小基序肽及其扩展短肽和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物工程和免疫学技术领域，具体涉及人卵透明带蛋白-4能被特异单抗识别的表位最小基序肽及其扩展短肽和应用。

背景技术

除了小鼠，包括人类在内的哺乳动物卵透明带（zona pellcida，ZP）都由四个糖蛋白（分别被命名为ZP1，ZP2，ZP3和ZP4）组成。作为抗生育环节之一，阻断人精卵结合受精从而导致不孕无疑是不会引起争议的最理想途径。因此，40多年来世界上许多实验室一直在开展ZP避孕疫苗的研究。虽然以小鼠和兔等为动物模型的许多研究证实了ZP或单一ZP3蛋白抗原主动免疫的抗生育充分有效性，但受试动物都发生卵巢炎、卵泡和卵巢萎缩或卵子发生衰减等病理现象。对人类而言，ZP疫苗这方面的免疫副作用显然是不可接受的。为此，如何克服ZP疫苗的这一严重缺陷是相关研究人员始终关注的焦点，也获得了一些重要进展。例如，美国NIH的Dean实验室首先用一单克隆抗体（以下简称单抗）鉴定出小鼠精子受体ZP3蛋白羧基端的一个线性B细胞表位（以下简称表位），并以其表位化学合成肽作为免疫原获得了不完全的抗生育效果（Millar SE, et al. Vaccination with a synthetic zona pellucida peptide produces long-term contraception in female mice. Science 1989; 246: 935-938）。随后发现该表位合成肽在其他一些近交系小鼠品系仍然出现卵巢炎，并证明它是由其长表位肽中的一ZP特异致病性T细胞表位造成，剔除此T细胞表位的合成肽疫苗则可消除小鼠ZP免疫卵巢炎（Lou YH, et al. A zona pellucida 3 peptide vaccine induces antibodies and reversible infertility without ovarian pathology. J Immunol 1995; 155: 2715-2720）。已知T细胞表位通常由9～30个氨基酸残基构成，而B细胞表位则由3～8个残基组成，显然通过鉴定B细胞表位最小基序就能排除在一长表位肽中可能存在的T细胞表位（Bagavant H, et al. Immunogenicity and contraceptive potential of a human zona pellucida 3 peptide vaccine. Biol Reprod 1997; 56: 764-770）。