[发明专利]一种用于检测人视黄醇结合蛋白4的抗体复合物及免疫层析检测卡和试剂盒无效
申请号: | 201210141597.2 | 申请日: | 2012-05-08 |
公开(公告)号: | CN102650642A | 公开(公告)日: | 2012-08-29 |
发明(设计)人: | 邢国杰;沈鹤柏 | 申请(专利权)人: | 上海师范大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/558 |
代理公司: | 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司 31227 | 代理人: | 吴瑾瑜 |
地址: | 200234 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 人视黄醇 结合 蛋白 抗体 复合物 免疫 层析 试剂盒 | ||
1.一种用于检测人视黄醇蛋白4的抗体复合物,其特征在于,制备方法为将人视黄醇蛋白4单克隆抗体1标记于胶体金颗粒表面,包括以下步骤:
将含有胶体金颗粒的溶液pH调节至8.2~8.7,加入人视黄醇蛋白4单克隆抗体1,震荡反应5~15分钟,封闭后离心、沉淀重悬后再次离心纯化。
2.权利要求1所述用于检测人视黄醇蛋白4的抗体复合物,其特征在于,所述胶体金颗粒的粒径为10~30nm,含有胶体金颗粒的溶液浓度为0.5~2mg/mL。
3.权利要求1所述用于检测人视黄醇蛋白4的抗体复合物,其特征在于,人视黄醇蛋白4单克隆抗体1与胶体金颗粒用量比为1~8μg:1mg。
4.权利要求1所述用于检测人视黄醇蛋白4的抗体复合物,其特征在于,用pH=8.5~9.5、浓度为0.001~0.005mol/L的硼酸缓冲液重悬沉淀。
5.人视黄醇结合蛋白4的免疫层析检测卡,其特征在于,结构包括结合垫、样品垫、分析膜和吸水纸,分析膜上包括检测线和质控线;
所述的结合垫上含有权利要求1~4任一项所述的用于检测人视黄醇蛋白4的抗体复合物;
所述的检测线上含有人视黄醇蛋白4单克隆抗体2。
6.权利要求5所述人视黄醇结合蛋白4的免疫层析检测卡,其特征在于,所述质控线上含有羊抗鼠IgG抗体。
7.权利要求5所述人视黄醇结合蛋白4的免疫层析检测卡,其特征在于,所述结合垫的制备方法为:用于检测人视黄醇蛋白4的抗体复合物与胶体金稀释液混合按1:15~30的体积比混合后喷在结合垫材料上;
样品垫的制备方法为:样品垫材料用处理液浸泡并干燥。
8.权利要求7所述人视黄醇结合蛋白4的免疫层析检测卡,其特征在于,样品垫材料选自玻璃纤维素膜;结合垫材料选自玻璃纤维素膜;处理液为pH=7.2~7.5、0.005~0.02mol/L的磷酸缓冲液,含0.5%~1.0%BSA,0.3%~0.8%聚乙烯基吡咯烷酮,0.1%~0.3%吐温-20;
胶体金稀释液为0.03~0.08mol/L、pH=7.8~8.2的Tris-HCl缓冲液,含0.5%~1.0%BSA,0.3%~0.8%聚乙烯基吡咯烷酮,0.2%~0.5%聚乙烯醇,1.0%~3.0%蔗糖,0.1%~0.3%吐温-20,聚乙烯醇的分子量为10000~25000。
9.一种检测人视黄醇结合蛋白4的试剂盒,其特征在于,包括权利要求5~8任一项所述的人视黄醇结合蛋白4的免疫层析检测卡和样品稀释液,所述样品稀释液为pH7.2~7.4、0.005~0.02mol/L的磷酸缓冲液,含有3%~6%BSA和0.3%~0.5%防腐剂。
10.权利要求1~4任一项所述的用于检测人视黄醇蛋白4的抗体复合物在制备检测人视黄醇蛋白4的试剂方面的应用。
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