[发明专利]一种高嘌呤饲料喂养致生活性高血压动物模型的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种高嘌呤饲料喂养致生活性高血压动物模型的制备方法，该模型可用于治疗生活性高血压药物的筛选、药理研究及药效评价。

背景技术

随着人们生活水平的提高和饮食结构的改变，高尿酸血症愈来愈常见。国外有研究发现，基础血尿酸水平是高血压最强的独立预报因子。同时，高尿酸血症又可引尿酸性肾病。而肾脏通过体液调节和血管活性物质的生成，直接参与原发性高血压的发生。而高血压是肾脏损害的重要独立危险因素，增加肾脏疾病的发病率以及肾功能衰竭的发生率和致死率。反之，肾脏损害又加重高血压，从而形成恶性循环。

目前尚没有规范地通过长期食用高嘌呤食物造成的高血压动物模型。而在药理实验中找到一个最能接近人体高血压模型的高血压大鼠模型，寻找引发人体高血压的确切因素及相应的症状指标，从而找到对人体高血压更有效的药物，显得尤为重要。目前实验室常见的高血压大鼠模型有自发性高血压大鼠、两肾一夹型高血压大鼠模型等，但未见贴近人类高血压形成病机的动物模型，本发明根据日常生活中，人体高血压形成诱因，如长期使用高嘌呤食物，建立了一种可用于治疗生活性高血压药物的筛选、药理研究及药效评价研究的动物模型。

发明内容

本发明的目的是建立一种用于治疗高血压药物筛选、药理研究及药效评价的生活性高血压动物模型的制备方法。为解决上述技术问题，本发明通过以下技术方案实现：在正常SD大鼠基础上，模型组大鼠每天饲养高嘌呤饲料（5～10%酵母干粉、0.1%～0.5%腺嘌呤，剩余为大鼠基础饲），8～17周，造成生活性高血压动物模型。

模型筛选指标主要为收缩压、舒张压、平均压，以收缩压为主；同时测血清中丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶、尿酸、肌酐、钾、钠、氯、总钙离子和尿液中肌酐、尿酸等含量为辅，监测长期食用高嘌呤饲料对大鼠血压及肝、肾等脏器功能的影响。

具体实施方式

实施例1 

1 实验材料与仪器

  1.1动物 SD大鼠，雌雄各半，体重180～220g，20只。许可证号SCXK（浙）20080033，由浙江省实验动物中心提供。

仪器  ALC-NIBP无创血压测量分析系统（上海奥尔科特生物科技有限公司）；荷兰威图SELECTRA-E全自动生化仪（荷兰威图公司）；Powerwave340酶标仪（美国Bio-TEK公司）；DH-500K/Na/Cl/Ca/pH电解质分析仪（深圳百康立科技有限公司）。

试剂  丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶、尿酸、肌酐（上海复星长征医学科学有限公司）；BUN试剂盒，南京建成生物工程研究所；A定标/冲洗液、B斜率定标液、去蛋白清洗液，武汉中达生物传感技术有限公司制造。

实验方法

2.1 造模SD大鼠，雌雄各半，体重180～220g，20只。10只作为正常对照组，10只为模型造模组。模型造模组给予高嘌呤饲料喂养，8～17周，正常对照组给予普通饲料。实验期间，两组均自由饮水。

测定指标 于造模的0周、8周、17周分别测大鼠收缩压、舒张压、平均压；于造模的5周、8周、10周、12周，分别禁食10h后采血，采用生化法测定丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶、尿酸、肌酐的含量；同时测血清中钾、钠、氯、总钙的离子含量。于造模的7周、9周、11周、16周，将大鼠放入代谢笼中，自由饮水，检测尿液中肌酐、尿酸的含量。

统计分析　计量资料数据以                                                ± s表示，组间比较采用t-test检验；计数资料采用X²检验。

实验结果

3.1 造模因素对SD大鼠血压的影响

由表1可知，与正常对照组相比，造模第8周开始，模型造模组大鼠收缩压（SBP）明显升高 (P<0.01)。

表1  高嘌呤饲料致生活性高血压大鼠模型实验—收缩压血压统计表（± s，n=10）

注：与正常对照组比较，^*P <0.05， ^**P <0.01