[发明专利]用于分离培养干细胞的脂肪组织的长时间保存液

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地，本发明涉及用于分离培养干细胞的脂肪组织的长时间保存液。

背景技术

再生医学的兴起激发了人们对各种干细胞、组织工程支架和细胞生长因子的研究热潮，选用合适的干细胞作为种子细胞的来源已成为研究的焦点。

脂肪组织在人体内储量丰富，获取简便，通过抽脂从中获得的大量脂肪干细胞(adipos tissue-derived stem cells，ADSCs)不仅在体内体外具有多化潜能，在不同的诱导因子作用下可以向脂肪细胞、软骨细胞、肌细胞、成骨细胞、神经细胞、神经胶质细胞及胰岛细胞分化，而且可以分泌多种促血管生成因子和抗凋亡因子。最新的研究发现，ADSCs作为基因治疗的靶细胞具有抗炎、抗氧化的作用，有望成为临床上用来修复受损的组织和器官的理想干细胞来源，同时也为一系列疾病的治疗提供了新的思路。

自2001年Zuk等在脂肪组织中发现具有多向分化潜能的、成纤维细胞样的干细胞以来，相继在包括人类在内的多个物种的研究结果表明其具有多向分化能力。脂肪干细胞(adipose tissue-derived stem cells，ADSCs)有望成为组织工程的“种子细胞”之一。脂肪干细胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）是近年来从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞。所谓干细胞，是一群可再生、多潜力及可分化的细胞，用之可使真皮皮下脂肪及真皮再生，合并自体脂肪治疗解决自体脂肪治疗再吸收的问题，而且脂肪干细胞也将消除来自胚胎干细胞的伦理争议；尤其重要的是，它的好处为来自自体，并无异体移植出现排斥的问题。

通常在医院可以通过抽脂手术来获得脂肪，而脂肪干细胞的获得需要在严格的GMP中进行，对于不能立即进行的分离脂肪组织，为了保证分离的脂肪组织新鲜度，需要准备脂肪组织的保存液，以保证脂肪组织在运输途中保持其生物活性，可以更好的获得脂肪干细胞。

发明内容

本发明的目的在于提供一种脂肪组织保存液，可以长时间保存离体的脂肪组织，从保存后的脂肪组织中分离提取得到的脂肪干细胞仍具有良好的生殖能力，能够保持其性状和分化潜能。

本发明的第一方面，提供一种脂肪组织保存液，包括以下组分：磷酸盐缓冲液、抗坏血酸。

在另一优选例中，所述抗坏血酸的浓度为1~10mg/ml。

在另一优选例中，所述抗坏血酸的浓度为3~7mg/ml。

在另一优选例中，所述抗坏血酸的浓度为4~6mg/ml。

在另一优选例中，所述磷酸盐缓冲液为磷酸氢二钠/磷酸二氢钠缓冲液或磷酸氢二钠/磷酸二氢钾缓冲液。

在另一优选例中，所述磷酸盐缓冲液的pH为7.0~7.6。

在另一优选例中，所述磷酸盐缓冲液的pH为7.2~7.4。

在另一优选例中，所述磷酸盐缓冲液的pH为7.4~7.6。

在另一优选例中，所示脂肪组织保存液的pH为7.0~7.6。

在另一优选例中，所述脂肪组织保存液的pH为7.2~7.4。

在另一优选例中，所述脂肪组织保存液的pH为7.4~7.6。

本发明的第二方面，提供第一方面所述的脂肪组织保存液的配制方法，包括以下步骤：

(a)配制磷酸盐缓冲液；

(b)于步骤(a)得到的磷酸盐缓冲液中加入抗坏血酸，混合均匀，得到所述脂肪组织保存液。

在另一优选例中，所述抗坏血酸的浓度为1~10mg/ml。

在另一优选例中，所述抗坏血酸的浓度为3~7mg/ml。

在另一优选例中，所述抗坏血酸的浓度为4~6mg/ml。

在另一优选例中，所述磷酸盐缓冲液为磷酸氢二钠/磷酸二氢钠缓冲液或磷酸氢二钠/磷酸二氢钾缓冲液。

在另一优选例中，所述磷酸盐缓冲液的pH为7.0~7.6。

在另一优选例中，所述磷酸盐缓冲液的pH为7.2~7.4。

本发明的第三方面，提供第一方面所述的脂肪组织保存液的用途，所述用途选自下组：

(a)用于保存脂肪组织；

(b)用于保持或提高脂肪组织中的脂肪干细胞的活力；

(c)用于保持或促进脂肪组织中的脂肪干细胞的分化潜能。

在另一优选例中，所述用途为用于长时间保存脂肪组织。

本发明的第四方面，提供一种脂肪组织混合物，包括以下组分：

(a)脂肪组织；和

(b)第一方面所述的脂肪组织保存液。