[发明专利]一种蛋白质结晶装置和利用该装置进行蛋白质结晶的方法无效
申请号: | 201210133165.7 | 申请日: | 2012-05-03 |
公开(公告)号: | CN102659916A | 公开(公告)日: | 2012-09-12 |
发明(设计)人: | 尹大川;陈瑞卿;刘永明;鹿芹芹;何进;马晓亮;商澎 | 申请(专利权)人: | 西北工业大学 |
主分类号: | C07K1/14 | 分类号: | C07K1/14;C12N9/00;C12N9/36;C12N9/08;C12N9/50;C12N9/90;C12N9/22;C12N9/56 |
代理公司: | 西北工业大学专利中心 61204 | 代理人: | 顾潮琪 |
地址: | 710072 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蛋白质 结晶 装置 利用 进行 方法 | ||
1.一种蛋白质结晶装置,包括结晶本体和密封部件,其特征在于:在结晶本体上设有凹槽,用于放置待结晶的蛋白质溶液,密封部件覆盖在结晶本体上,密封所述的凹槽,形成密封的蛋白质结晶空间。
2.根据权利要求1所述的蛋白质结晶装置,其特征在于:所述的凹槽分别设置在结晶本体的两个相对的侧面上。
3.根据权利要求1所述的蛋白质结晶装置,其特征在于:所述的密封部件选择透明胶带、结晶封板膜、结晶专用密封胶带或透明的密封膜中的一种。
4.根据权利要求1所述的蛋白质结晶装置,其特征在于:所述的结晶本体选择透明材质的材料制成,包括有机玻璃、钢化玻璃、塑料、石英玻璃、高硅氧玻璃、普通平板玻璃、铅硅酸盐玻璃、铝硅酸盐玻璃、硼硅酸盐玻璃或钠钙玻璃。
5.根据权利要求1所述的蛋白质结晶装置,其特征在于:所述的凹槽的底部还设有若干相互分离的储液槽,用于放置蛋白质结晶溶液,并且使得放置于储液槽内的蛋白质结晶溶液相互分离,不会相互混合或聚集。
6.一种利用权利要求1所述装置进行蛋白质结晶的方法,其特征在于包括下述步骤:
1)将蛋白质加入到缓冲溶液中,溶解,然后通过过滤去除杂质,制成蛋白质溶液;
2)将蛋白质结晶筛选试剂盒中的结晶剂转移到蛋白质结晶装置的同一个凹槽内,结晶剂之间相互分离,彼此不接触,然后将蛋白质溶液转移到蛋白质结晶装置的凹槽内与蛋白质结晶剂混合制得不同结晶条件的蛋白质结晶溶液;
3)用密封部件密封蛋白质结晶装置的凹槽,于恒温条件下静置,结晶。
7.根据权利要求6所述的蛋白质结晶的方法,其特征在于:所述的步骤1)中蛋白质包括溶菌酶、过氧化氢酶、糜蛋白酶原A II、刀豆球蛋白、蛋白酶K、葡萄糖异构酶、索马甜蛋白、核糖核酸酶A VII或枯草杆菌蛋白酶A VII;缓冲溶液选择醋酸-醋酸钠缓冲液、HEPES-Na缓冲液、磷酸盐缓冲液或柠檬酸盐缓冲液;蛋白质溶液的浓度>0,并且≤50mg/m。
8.根据权利要求6所述的蛋白质结晶的方法,其特征在于:所述的步骤2)中蛋白质结晶试剂与蛋白质溶液的体积之比为0.1-10∶1;分装于结晶装置凹槽内的各蛋白质结晶溶液的体积为0.05~4μL。
9.根据权利要求6所述的蛋白质结晶的方法,其特征在于:所述的步骤3)中恒温选自0-60℃温度范围中的任何一种温度;静置时间为24~240小时。
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