[发明专利]一种高品质超低分子量肝素的制备方法

权利要求书

1.一种高品质超低分子量肝素钠的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）肝素-苯索氯铵盐的合成：按1：2~3的重量比称取肝素钠和苯索氯铵盐，分别溶于蒸馏水中，将在肝素钠溶液缓慢加入到苯索氯铵盐溶液中，搅拌2小时以上，静置分层，去上清，并将剩余悬浮物离心，收集沉淀物肝素-苯索氯铵盐，然后洗涤并干燥；

2）肝素苄基酯的合成：将（1）所得肝素-苯索氯铵盐溶于二甲基甲酰胺，然后加入氯化苄，于55~60℃下进行酯化反应25~30小时；

3）苄基肝素钠盐的合成：配制饱和的醋酸钠乙醇溶液，加入到（2）所得的料液中并搅拌，控制料液温度15℃以下，静置6小时以上，吸去上清液，将下层悬浊液离心，收集沉淀物苄基肝素钠盐，然后洗涤；

4）重盐化：称取苄基肝素钠2.5倍重量的苯索氯铵盐，和苄基肝素钠在水溶液中搅拌反应2小时以上，而后再静置分层，去上清，将剩余悬浮物离心，收集沉淀物肝素苄基酯苯索氯铵盐，并用蒸馏水洗涤；

5）解聚反应：将苄基肝素苄索铵盐溶于二氯甲烷中，并加入磷腈碱作为催化剂，在室温下搅拌反应24小时以上，然后将反应液转移至饱和的醋酸钠甲醇溶液中，出现沉淀后，离心分离，所得为解聚合的苄基肝素钠盐，甲醇洗涤并干燥； 

6）皂化：将解聚的苄基肝素钠盐溶于蒸馏水中，于10℃以下，加入氢氧化钠反应2小时以上，再加入氯化钠并用稀盐酸调整pH为6.5~7.5，然后向反应液中加入2~3倍的甲醇沉淀，将沉淀洗涤并干燥；

7）碱氧纯化：将（6）中所得沉淀溶于蒸馏水中，调整pH值到9.0～11.0，加入过氧化氢在室温搅拌反应6～8小时；

8）物理纯化：将料液转移至纳滤循环罐进行纳滤；测定截留液相对平均分子量和分子量分布，若相对分子量和分子量分布不符合要求，则用1000 Da超滤膜进行超滤操作；再调节滤液pH值到6.5~7.4之间，经0.22 μm微孔滤器过滤；

9）冻干：滤液放入冻干机中干燥。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，肝素苄基酯的合成中，每公斤肝素-苯索氯铵盐加入的氯化苄的体积为1L。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，解聚反应中，磷腈碱加入量为苄基肝素苄索铵盐质量的1%。