[发明专利]蛋白质类药物三维构像的抗体阵序列检测方法

权利要求书

1.一种蛋白质类药物三维构像的抗体阵序列检测方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)将选取的蛋白质药物的氨基酸序列被用来设计相应的多肽抗原，该多肽抗原的氨基酸数量为15～50个；

(2)多肽抗原通过联接一个半胱氨酸与蛋白质载体共价结合，结合的方式是N末端或C末端；

(3)多肽抗原与蛋白质载体共价结合后通过动物产生多肽抗体，其中，动物选自马、羊、牛、兔子、鸡或鼠中的一种；

(4)将多肽抗体采用双抗夹心酶标记免疫吸附检测法测定蛋白质类药物三维构像。

2.根据权利要求1所述的蛋白质类药物三维构像的抗体阵序列检测方法，其特征在于步骤(1)中所设计的相邻的两个多肽抗原有重叠的氨基酸序列，重叠数目为1个～10个，优选为5个。

3.根据权利要求1所述的蛋白质类药物三维构像的抗体阵序列检测方法，其特征在于步骤(2)中多肽抗原与蛋白质载体共价结合的化学反应选用的交联剂为二氯乙烷或甲基丙烯酸甲酯-丁二烯-苯乙烯三元共聚物，优选甲基丙烯酸甲酯-丁二烯-苯乙烯三元共聚物；多肽抗原与蛋白质载体的当量比为10∶1～50∶1，优选20∶1；蛋白质载体为血蓝蛋白或牛血清白蛋白，优选血蓝蛋白。

4.根据权利要求1所述的蛋白质类药物三维构像的抗体阵序列检测方法，其特征在于步骤(3)中注射动物的抗原剂量为50微克/次/只～5毫克/次/只，优选为1毫克/次/只。

5.根据权利要求1所述的蛋白质类药物三维构像的抗体阵序列检测方法，其特征在于步骤(3)中动物选用新西兰白兔。

6.根据权利要求1所述的蛋白质类药物三维构像的抗体阵序列检测方法，其特征在于步骤(4)的具体步骤为：将双抗夹心酶标记免疫吸附检测法检测盒的平板分组用不同的多肽抗体包被，在经过牛血清白蛋白覆盖后，需要测定的蛋白质药物可以在不同浓度下与检测盒孔中的多肽抗体相混合，当蛋白质药物的表面有与孔中相应的多肽抗体所对应的抗原点，孔中的多肽抗体将与这部分蛋白质药物形成复合物，在下一步，一种抗人体免疫球蛋白的多克隆抗体将填加到检测盒的孔中，抗人体免疫球蛋白是经过生物素共价标记的，当孔中有多肽抗体与抗人体免疫球蛋白的复合体，抗人体免疫球蛋白将进一步与这个复合体形成更高一级的复合体，为多肽抗体-蛋白质药物-抗人体免疫球蛋白复合体，此复合体可以进一步与酶联亲和素形成复合体，而这个复合体的数量可以用过氧化酶的底物的转化反应出来，最后经分光光度计经光吸收测定蛋白质类药物的三维构像。

7.根据权利要求6所述的蛋白质类药物三维构像的抗体阵序列检测方法，其特征在于双抗夹心酶标记免疫吸附检测法检测盒采用24孔平板、96孔平板或384孔平板中的一种，优选采用96孔平板。

8.根据权利要求6所述的蛋白质类药物三维构像的抗体阵序列检测方法，其特征在于双抗夹心酶标记免疫吸附检测法检测盒被多肽抗体包被的温度为4摄氏度或室温，优选为4摄氏度。