[发明专利]一种尿微量白蛋白液体定量检测试剂及方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种尿微量白蛋白（Urinary Microalbumin）液体定量检测试剂和方法。 

背景技术

尿液是由某些血液成分经过肾小球滤过作用，肾小管重吸收、集合、排泌形成的。临床尿液检查可以直接帮助医生了解病患的泌尿生理功能和病理功能的变化，也可以间接反映全身多脏器及系统的功能情况。国内外临床尿检验非常普遍，许多与肾功能，心血管，代谢病，感染病等有关领域的检验需要用尿液进行。常规的尿检验包括以下10项：葡萄糖（GLU)，胆红素(BIL)，尿胆原(URO)，酮体(KET)，白细胞(LEC)，亚硝酸盐（NIT)，蛋白质(PRO)，酸碱度（pH），潜血（BLD）和比重（SG）。 

蛋白尿（Proteinuria）指的是尿液中含有非正常高浓度蛋白质的病症，尿蛋白主要为白蛋白，同时也包含一些球蛋白和肾元分泌的蛋白质。在正常情况下，大多数蛋白质是不能通过肾小球的滤过作用而进入尿液的，但是在肾脏功能受到损坏的情况下，一些蛋白质会进入尿液，形成蛋白尿。对蛋白尿病人的尿蛋白（Urine Protein）和尿微量白蛋白（Urine Microalbumin）进行定量分析，能够让医生知道病人是属于微量白蛋白尿症 （Microalbuminuria）还是大量白蛋白尿症（Macroalbuminuria）。正常人尿中微量白蛋白浓度<2 mg/dL，微量白蛋白尿是肾病的早期症兆，是反映全身微循环的重要组成部分，是肾小球毛细血管通透性的指标，其特征是尿白蛋白的浓度为2-20 mg/dL；大量白蛋白尿症的白蛋白浓度> 20 mg/dL，且病情严重，经常是高血压或者糖尿病引起。国内目前应用的尿检验技术主要是干化学试纸定性检验系统，只能提供定性分析结果如阴性或阳性，不能定量。同时，干化学试纸法受影响因素也较多，临床工作中不可避免地会出现假阴性和假阳性。此外，干化学试纸条受到灵敏度的限制，大于20 mg/dL才呈现阳性，而此时肾脏病变已经不可逆。为了对肾病进行早期预测，为临床医生提供准确的诊断信息，进行尿微量白蛋白定量检验具有重要的意义。 

发明内容

本发明所要解决的技术问题是弥补现有的干化学试剂系统存在的缺陷，提供一种尿微量白蛋白液体定量检测试剂及方法。 

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案是一种试剂由R1试剂和R2试剂组成，R1试剂由以下方法制备： 往烧杯中加入2-10 g氯化钠、1-10 g磷酸氢二钠、0.1-2.0 g磷酸二氢钾、0.1-10 g叠氮化钠、10-100 g聚乙二醇，用1L蒸馏水搅拌至固体化学物完全溶解，形成R1试剂； 

R2试剂优选由以下方法制备： 

a、用1L磷酸盐缓冲液溶解0.1-2.0g 叠氮化钠，搅拌至完全溶解后，形成中间溶液；

b、加入与中间溶液体积比为1:20-1:100 的抗人白蛋白抗体，形成均一性的R2试剂。

本发明所述的R1试剂由以下方法制备： 往烧杯中加入4 g氯化钠、5.5 g磷酸氢二钠、1.0 g磷酸二氢钾、5g叠氮化钠、10 g聚乙二醇，用1L蒸馏水搅拌至固体化学物完全溶解，形成R1试剂； 

R2试剂优选由以下方法制备： 

a、用1L磷酸盐缓冲液溶解0.5g 叠氮化钠，搅拌至完全溶解后，形成中间溶液；

b、加入与中间溶液体积比为1:50 的抗人白蛋白抗体，形成均一性的R2试剂。

本发明所述的任意一种试剂的尿微量白蛋白液体定量检测方法，其特征在于包含以下步骤： 

a、把所述尿微量白蛋白液体定量检测试剂的R1试剂和R2试剂，分装后分别放入自动化分析仪的R1和R2试剂仓，然后进行尿微量白蛋白检测项目的参数设置；样品体积：2－10ml，R1试剂： 50－200ml， R2试剂：10－100ml，校准类型：5AB，波长：340nm，检测方法：终点法，测光点：0－30；

b、设定5个标准品浓度，分别为0mg/dL、1mg/dL、5mg/dL、10mg/dL、30mg/dL，测定不同浓度标准品的吸光值，制作浓度对吸光值的标准曲线；

c、根据标准曲线进行试剂检测灵敏度分析；

d、根据标准曲线进行样品的精密度和回收率试验；

e、根据标准曲线进行常用药物的干扰分析试验。

本发明所述的尿微量白蛋白液体定量检测方法，灵敏度达到0.16 mg/dL。