[发明专利]一株枯草芽孢杆菌及其应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物领域，特别涉及一株枯草芽孢杆菌及其应用。

背景技术

随着养鸡生产的规模化集约化，鸡舍内饲养密度增大，空间相对狭窄，空气流通能力差，产生的有害气体中，氨气（NH₃）是对鸡危害最大、引起鸡舍环境恶臭的主要有害气体之一，而氨气是饲料中未被消化的蛋白质中的氮元素发酵产生的。在我国，多数地区以农户养鸡为主，普遍存在规模小，资金投入少，采用人工操作，工作量大的现状，不能做到每天及时清粪，因此很容易造成舍内鸡粪堆积和发酵，产生恶臭污染环境；如果生产管理不当，将会严重影响舍内空气质量、鸡只生产性能及工作人员的健康。

为了改善鸡舍空气质量，可以通过减少鸡粪中蛋白质的含量，降低鸡舍内氨气含量。然而，鸡的消化道较短，对于鸡饲料中的蛋白质消化率较低。

芽孢杆菌是生产蛋白酶的主要菌种，在鸡饲料中使用芽孢杆菌具有以下优点：耐高温、耐酸碱、耐挤压，能够耐受饲料加工的影响；在饲料保存过程中，以孢子形式存在，不消耗饲料养分；进入消化道后，在肠道中复活率接近100%；能够产生各种消化酶类、氨基酸和维生素等益生物质；在肠道可以消耗大量氧，维持肠道厌氧环境。但现有枯草芽孢杆菌存在以下缺陷：在鸡消化道内产蛋白酶能力不高。 

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一株枯草芽孢杆菌及其应用，在鸡消化道内产蛋白酶能力高、可显著提高鸡饲料蛋白质消化率，可应用于鸡饲料中。

本发明的技术解决方案：

一株枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）KW119，于2012年2月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No. 5789。

所述的枯草芽孢杆菌KW119在鸡饲料中的应用。

所述的枯草芽孢杆菌KW119在鸡饲料中的应用，以菌粉的形式添加到饲料中，菌粉中活菌数为2.0×10⁸cfu/g，在肉仔鸡饲料或产蛋鸡饲料中所述菌粉的添加量为0.2%。

本发明通过平板初筛、模拟鸡肠道生境复筛，最终得到一株能在鸡肠道生境条件下高产蛋白酶的枯草芽孢杆菌KW119，其有益效果是： 

枯草芽孢杆菌KW119在鸡肠道生境条件下产蛋白酶能力较高，达到538.5U/mL；通过产生蛋白酶，能促进饲料中蛋白质的消化，提高饲料蛋白质的消化率，在鸡饲料里添加0.2%活菌数为2.0×10⁸cfu/g的枯草芽孢杆菌KW119菌粉后，饲料蛋白质消化率提高17%；提高饲料的利用率，减少粪便中的氮含量，降低了鸡舍中氨气质量浓度，改善了鸡舍环境，减少环境污染，有利于鸡只的健康生长。

枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）KW119，于2012年2月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No. 5789。

具体实施方式

一、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）KW119菌株的获得

1、培养基

富集培养基：牛肉膏3g，蛋白胨10 g，NaCl 5 g，蒸馏水1000mL，调节pH至6.5～7.0；

分离培养基：豆粕40g，Na₂HPO₄ 1g，KH₂PO₄ 1g，琼脂15g，蒸馏水1000mL，调节pH至6.5～7.0； 

初筛培养基：牛肉膏3g，酪素10g，NaCl 5g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，调节pH至6.5～7.0；

种子培养基：葡萄糖10g，蛋白胨5g，酵母膏5g，KH₂PO₄ 1g，MgSO₄ 0.2g，Na₂CO₃ 10g，蒸馏水1000mL，调节pH至6.5～7.0；

发酵培养基：豆粕40g，蒸馏水1000mL，调节pH至6.5～7.0；

固体斜面培养基：葡萄糖10g，蛋白胨5g，酵母膏5g，KH₂PO₄ 1g，MgSO₄ 0.2g，Na₂CO₃ 10g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，调节pH至6.5～7.0。

2、菌株的分离