[发明专利]一种宁夏枸杞中活性成分的提取制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种活性成分的提取方法，尤其是涉及一种宁夏枸杞中活性成分的提取制备方法。

背景技术

枸杞子是我国的传统名贵中药材，是“药食同用”的上等补品，宁夏枸杞更是被国家药典定为真正正品。现代药理学研究证实，宁夏枸杞具有提高机体免疫，抗衰老，抗肿瘤，益精明目，降低血脂等多方面的药理作用。国内外学者很早就开始对宁夏枸杞的化学成分进行研究，发现宁夏枸杞的化学成分主要为枸杞多糖、黄酮及其苷类、香豆素、类胡萝卜素、氨基酸和无机元素等。在化学成分研究过程中主要用的分离材料有：硅胶、聚酰胺、葡萄糖凝胶等，这些分离材料普遍存在分离量少、分离效率低等缺点，制备大量单体活性成分遇到困难。C18是应用比较普遍的分离材料，但对于小极性组分洗脱出峰慢，洗脱时间增长，在分离较复杂样品时效率较低。

发明内容

本发明的目的主要是克服现有技术的不足，提供一种利用自制短碳链C8分离材料应用于宁夏枸杞活性成分的制备、并能快速制备宁夏枸杞活性成分的一种宁夏枸杞中活性成分的提取制备方法。

本发明通过如下方式实现：

一种宁夏枸杞中活性成分的提取制备方法，其特征在于：该提取制备方法包括以下步骤：

（1）样品提取：将宁夏枸杞子除杂烘干后粉碎，过40～60目筛，得枸杞粉末，干燥枸杞粉末放入多功能提取罐中，用石油醚提取色素等脂溶性物质，料液比即枸杞质量与溶剂体积比为1：10－1：30，提取2次，每次2h，将去除色素的残渣放入多功能提取罐中，加入80%的乙醇提取，料液比即枸杞质量与溶剂体积比为1：20，提取温度55～60℃提取2次，每次提取2h，合并乙醇提取液减压浓缩至无醇味浸膏；

（2）大孔吸附树脂纯化：将步骤（1）浸膏加入以体积计为1:3－1:5的去离子水，超声振荡，水溶液上AB-8大孔吸附树脂柱，先用2-3倍去离子水洗脱，弃去洗脱液，再用3-5倍95%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至酒精含量不超过5%的浓浸膏备用；

（3）乙酸乙酯萃取：将步骤（2）所得浓浸膏用3倍量体积的水溶解后用等体积的乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯层，减压浓缩得乙酸乙酯萃取液浸膏；

（4）正丁醇萃取：将步骤（3）所剩水层用1-3倍体积水饱和正丁醇萃取，减压浓缩得正丁醇萃取液浸膏；

（5）C8分离材料的制备；

（6）活性成分的分离：将步骤（3）乙酸乙酯浸膏过自制C8分离材料玻璃开放柱，以甲醇：水的体积比为22：78进行洗脱，TLC检测合并相同组分并反复过柱得5种单体化合物A、B、C、D、E，经HPLC-MS, NMR鉴定其结构为槲皮素、杨梅素、金合欢素、芦丁、东莨菪素；将步骤（4）正丁醇浸膏过自制C8分离材料玻璃开放柱，以甲醇：水为15：85的体积比进行洗脱，TLC检测合并相同组分并反复过柱得2种单体化合物F、G，经HPLC-MS，NMR鉴定其结构为东莨菪苷、皮契荔枝苷；

所述C8分离材料的制备方法为：400-600g 200－300目层析硅胶，用700-1000mL 10％盐酸酸化，加入的300-500mL八烷基三氯硅烷，在500-800mL无水甲苯介质中反应，过滤产物，然后用30-50mL三甲基氯硅烷封尾，得C8分离材料，用元素分析、表面能谱技术表征元素含量，配体的键合量7.0mmol/g，吸附容量为50mg/g。