[发明专利]吴茱萸碱衍生物单克隆抗体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种分泌吴茱萸碱衍生物单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其保藏号为CCTCC NO：C201201。

2.一种吴茱萸碱衍生物单克隆抗体，其特征在于，由保藏号为CCTCC NO：C201201的杂交瘤细胞株产生。

3.根据权利要求2所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体为IgG1，κ型。

4.一种权利要求1-3任一项所述的吴茱萸碱衍生物单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包含步骤：

1)将吴茱萸碱衍生物与BSA交联，获得抗原：吴茱萸碱衍生物-BSA；

其中所述吴茱萸碱衍生物的结构式如下：

2)用步骤1)获得的抗原与福氏不完全佐剂乳化，免疫小鼠；

3)从免疫小鼠中获取免疫脾细胞，然后与骨髓瘤细胞融合，筛选效价高的杂交瘤细胞；

4)对小鼠注射步骤3)所述杂交瘤细胞的悬液，诱导腹水产生，检测腹水效价，分离杂交瘤细胞分泌的抗体，获得所述吴茱萸碱衍生物单克隆抗体。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤4)中通过亲和层析纯化所述吴茱萸碱衍生物单克隆抗体。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，进一步包括步骤：用单克隆抗体Ig亚类鉴定法鉴定步骤4)所述吴茱萸碱衍生物单克隆抗体的类型。

7.权利要求4所述的吴茱萸碱衍生物单克隆抗体在检测吴茱萸碱衍生物在细胞内的分布中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，吴茱萸碱衍生物单克隆抗体检测吴茱萸碱衍生物在细胞内的分布的方法包括步骤：将小鼠腹腔巨噬细胞接种于已放置玻片的24孔板中，孵育过夜，向其中加入吴茱萸碱衍生物溶液使其作用，PBS冲洗后用多聚甲醛固定，然后通过Triton-100打孔，血清封闭后，加入吴茱萸碱衍生物单克隆抗体，孵育过夜，再加入荧光标记的二抗，染核后封片检测。

9.一种ELISA试剂盒，其包括：权利要求4所述的吴茱萸碱衍生物的标准品、吴茱萸碱衍生物单克隆抗体，预包被抗原吴茱萸碱衍生物-卵清蛋白的96孔板；酶标羊抗鼠二抗，TMB显色液，终止液。

10.权利要求9所述的ELISA试剂盒在检测吴茱萸碱衍生物含量中的应用。