[发明专利]一种以3’-核苷酸酶为标签的重组蛋白表达纯化系统及方法和应用有效

专利信息
申请号: 201210125080.4 申请日: 2012-04-26
公开(公告)号: CN102676566A 公开(公告)日: 2012-09-19
发明(设计)人: 孙梅好;杨依林;杨洋;王艳兴;李鸿艳;马建辉 申请(专利权)人: 浙江师范大学
主分类号: C12N15/70 分类号: C12N15/70;C12N15/66;C07K1/16;C07K14/245;C07K14/46;C12N9/02
代理公司: 杭州丰禾专利事务所有限公司 33214 代理人: 王从友
地址: 321004 *** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 核苷酸 标签 重组 蛋白 表达 纯化 系统 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种以3’-核苷酸酶为标签的重组蛋白表达纯化系统,其特征在于该系统包括:

1)3’-核苷酸酶核苷酸序列和蛋白超表达载体;

2)加入蛋白酶识别位点的3’-核苷酸酶核苷酸序列;

3)与所述的蛋白酶识别位点相匹配的蛋白酶核苷酸序列;

4)含有Li+和Ca2+至少一种离子的裂解液;

5)含有Li+和Ca2+至少一种离子的螯合剂的洗脱液;

6)PAP琼脂糖凝胶。

2.根据权利要求1所述的一种以3’-核苷酸酶为标签的重组蛋白表达纯化系统,其特征在于所述的蛋白酶与蛋白酶识别位点选用以下之一种:

蛋白酶名称蛋白酶识别位点肠激酶DDDDK/改进型烟草蚀纹病毒蛋白酶ENLYFQ/G 人鼻病毒3C蛋白酶LEVLFQ/GPUb1 specific protease 1 Tertiary structure of SUMO protein凝血酶素LVPR/GS因子XaIEGR/二肽酶XX/KX、XX/RX、XX/XXP、XX/XP或XX/QX

3.根据权利要求1所述的一种以3’-核苷酸酶为标签的重组蛋白表达纯化系统,其特征在于纯化系统还可以包括含有Ca2+离子的缓冲液,所述的含有Ca2+离子的缓冲液再优选包括Na+离子。

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