[发明专利]一种以3’-核苷酸酶为标签的重组蛋白表达纯化系统及方法和应用有效
| 申请号: | 201210125080.4 | 申请日: | 2012-04-26 |
| 公开(公告)号: | CN102676566A | 公开(公告)日: | 2012-09-19 |
| 发明(设计)人: | 孙梅好;杨依林;杨洋;王艳兴;李鸿艳;马建辉 | 申请(专利权)人: | 浙江师范大学 |
| 主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/66;C07K1/16;C07K14/245;C07K14/46;C12N9/02 |
| 代理公司: | 杭州丰禾专利事务所有限公司 33214 | 代理人: | 王从友 |
| 地址: | 321004 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 核苷酸 标签 重组 蛋白 表达 纯化 系统 方法 应用 | ||
1.一种以3’-核苷酸酶为标签的重组蛋白表达纯化系统,其特征在于该系统包括:
1)3’-核苷酸酶核苷酸序列和蛋白超表达载体;
2)加入蛋白酶识别位点的3’-核苷酸酶核苷酸序列;
3)与所述的蛋白酶识别位点相匹配的蛋白酶核苷酸序列;
4)含有Li+和Ca2+至少一种离子的裂解液;
5)含有Li+和Ca2+至少一种离子的螯合剂的洗脱液;
6)PAP琼脂糖凝胶。
2.根据权利要求1所述的一种以3’-核苷酸酶为标签的重组蛋白表达纯化系统,其特征在于所述的蛋白酶与蛋白酶识别位点选用以下之一种:
。
3.根据权利要求1所述的一种以3’-核苷酸酶为标签的重组蛋白表达纯化系统,其特征在于纯化系统还可以包括含有Ca2+离子的缓冲液,所述的含有Ca2+离子的缓冲液再优选包括Na+离子。
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