[发明专利]一种铅离子检测试纸条及其制备方法

权利要求书

1.一种铅离子检测试纸条，其特征在于：所述的试纸条由条形底板和在条形底板上依次搭接的样品垫、涂覆特异性条形码DNA-纳米金-脱氧核酶探针的玻璃纤维结合垫、特定包被的硝酸纤维膜和吸水垫组成，所述的特异性条形码DNA-纳米金-脱氧核酶探针在脱氧核酶的一端结合有生物素，其另一端结合有纳米金，在纳米金表面结合有若干条条形码DNA，在所述的硝酸纤维膜上，用链霉亲合素包被直线式质控线C线，用生物素化的俘获DNA和链霉亲合素结合的复合物包被直线式检测线T线，所述的生物素化的俘获DNA的碱基与所述的特异性条形码DNA-纳米金-脱氧核酶探针表面的条形码DNA的碱基之间互补配对，所述的特异性条形码DNA-纳米金-脱氧核酶探针的结构为

，所述的生物素化的俘获DNA的结构为biotin-5'-TTTTTTTTTTTTTTT-3'，所述的纳米金的直径为13～30 nm。

2.根据权利要求1所述的一种铅离子检测试纸条，其特征在于：所述的样品垫为经0.01～0.05 mol/L Tris-HCl缓冲液浸泡处理的玻璃纤维纸，其中Tris-HCl缓冲液含蔗糖的质量百分比为1～10%，pH值为5.0～8.0。

3.根据权利要求1所述的一种铅离子检测试纸条，其特征在于：所述的特异性条形码DNA-纳米金-脱氧核酶探针溶液在所述的玻璃纤维结合垫上的喷涂量为2.0～10 μL/cm²。

4.根据权利要求3所述的一种铅离子检测试纸条，其特征在于：所述的特异性条形码DNA-纳米金-脱氧核酶探针溶液为2 μL的100 μM序列为biotin-3'-ACTGTAGAGAAGG rA TATCACAAAAAAAAAAAAAAA-5'-SH的DNA与2 μL的100 μM序列为5'-TGACATCTCTTCTCCGAGCCGGTCGAAATAGTG-3'的DNA混合均匀得脱氧核酶结合物，然后将8 μL的100 μM序列为HS-5'-AAAAAAAAAAAAAAA-3'条形码DNA与脱氧核酶结合物混合均匀后，将4 mL的50 nM纳米金溶液加入上述混合物中，温育16 h后，离心弃去上清液，沉淀重新溶解于50 μL含100 mM NaCl和8%蔗糖的25 mM Tris-HCl缓冲液中所得。

5.根据权利要求1所述的一种铅离子检测试纸条，其特征在于：所述的生物素化的俘获DNA和链霉亲合素结合的复合物包被直线式检测线T线制备过程如下：108 μL的100 μM的生物素化的俘获DNA溶液与50 μL的2 mg/mL的链霉亲合素溶液混合均匀，室温下温育2 h后，12000 rpm下离心10 min，弃去上清液，用54 μL的25 mM的PBS缓冲液重新溶解后，以1～3 μL/cm喷涂于硝酸纤维膜形成检测线T线。

6.根据权利要求1所述的一种铅离子检测试纸条，其特征在于：所述的链霉亲合素包被用量为1.0～3.0 μg/cm。