[发明专利]一种芍药苷的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于医药、化学领域，具体涉及芍药苷的近红外光谱检测方法及其应用。

背景技术

近红外(near infrared，NIR)光谱分析是近年迅速发展起来的一种快速检测方法，它无需对样品做复杂的预处理即可直接对多种成分含量同时进行测定，具有快速、方便、无污染、非破坏性等优点，已在众多工业领域的过程分析和质量控制中得到应用。

芍药苷是多种中药材或中成药的指标成分。目前，芍药苷的含量测定主要为高效液相色谱法(HPLC法)，具有定量准确，重现性好的特点，但是一般需要复杂的前处理，分析时间长，难以在生产过程中对芍药苷的含量进行有效的在线监测。因此需要建立一种快速、简便的检测中药材或中成药中芍药苷含量的方法。

发明内容

为了实现上述发明目的，本发明提供了一种快速检测芍药苷含量的近红外光谱法。

根据本发明，检测方法包括以下步骤：

(1)收集芍药苷含量不同的中药材或中成药提取液，得到校正集样本；

(2)用HPLC法测定校正集样本的芍药苷含量；

(3)用近红外光谱仪扫描校正集样本，得到校正集样本的近红外光谱数据，选择合适的谱段区间和预处理方法，获取特征近红外光谱数据；

(4)建立步骤(3)中校正集样本的特征近红外光谱数据与步骤(2)中芍药苷含量之间的校正模型；

(5)取芍药苷含量已知的验证集样本，在与步骤(3)相同的条件下采集近红外光谱数据，根据建立的校正模型计算验证集样本的芍药苷含量以及与真值相比较的测量误差；

(6)在与步骤(3)相同的条件下采集待测样品的近红外光谱数据，应用所述校正模型对待测样品近红外光谱进行预处理，得到待测样品的芍药苷含量。

根据本发明实施方式之一，HPLC法色谱条件为C₁₈色谱柱，流动相A相为乙腈，B相为磷酸溶液。优选地，HPLC法色谱条件为流动相B相为0.02％磷酸溶液，洗脱梯度为：

0～15min，90％B相→80％B相；

15～20min，80％B相。

根据本发明实施方式之一，HPLC色谱条件为流速为0.5-1.5ml/min，检测波长为210-256nm，柱温为20-40℃。优选地，HPLC色谱条件为流动相流速为1ml/min，检测波长为230nm，柱温为30℃。

根据本发明实施方式之一，近红外光谱的采集方式及采集条件为：采用透射法扫描，扫描波长4000～12000cm^-1，扫描次数32次，分辨率8cm^-1，每份样品扫描3次，取平均数据作为校正集样本的近红外光谱数据。

根据本发明实施方式之一，预处理方法包括多元散射校正、标准正则校正、一阶或二阶微分、Norris导数滤波、Savitzky-Golay平滑。优选地，光谱预处理方法为多元散射校正法。

选择合适的光谱预处理技术能剔除干扰信号，提取关键信息，从而减少仪器噪音、基线不稳等因素带来的影响，提高模型的稳定性和预测的准确性。

发明人通过调整不断优化预处理方法，最终发现多元散射校正预处理方法在所有预处理方法中内部验证均方差(RMSECV)最小，模型的决定系数(R²)接近于1，说明模型具有良好的稳定性。

根据本发明实施方式之一，预处理的谱段选择为6101.9～5446.2cm^-1及4601.5～4424.1cm^-1区间。。

由于样品间的浓度差异不大，近红外透射光谱图十分接近，芍药苷的含量与个别波长点的吸光度之间无直接相关性，因此，不可能从某一个波长点来确定其含量；其次，如果建模波段过宽必然涵盖大量冗余信息。由于分子结构存在差异，使得各自对应的建模最优波段不同，因此，必须在一定的区间内建立数学模型来确定近红外光谱和已知含量的关系。