[发明专利]一种奥古斯碱的纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种奥古斯碱的纯化方法，特别是涉及一种应用超临界CO₂萃取和高速逆流色谱提取纯化奥古斯碱的方法。

背景技术

奥古斯碱为异喹啉生物碱，分子式C₁₇H₁₉NO₄，无色棱晶（苯），mp.174-176℃。奥古斯碱具有细胞毒活性，对多种癌细胞（BCA-1、HT-1080、LUC-1、MEL-2、COL-2、KB、P-388、A-431、LNCaP、ZR-75-1、U-373）呈细胞毒活性；对氯喹敏感或耐氯喹的疟原虫都有抗疟活性。

奥古斯碱来源于石蒜科奥古斯文殊兰（Crinum augustum Rox.）植物的全株，现代研究中很少见奥古斯碱的研究报道，该物质的相关研究尚处于起步阶段。

发明内容

本发明要解决的技术问题是填补该领域的空白，提供一种高纯度奥古斯碱的纯化方法，该方法产品收率高、含量高。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下：

一种奥古斯碱的纯化方法，其特征在于包括以下步骤：以石蒜科植物奥古斯文殊兰的全株为原料，粉碎，加入碱性醇浸润2-8小时，加入萃取釜中，采用超临界CO₂萃取，收集萃取物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用氨水调节pH至8-10，沉淀物以四氯化碳-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离，减压干燥即得高含量奥古斯碱。

所述碱性醇为pH9-12的90-99%乙醇溶液。

所述超临界CO₂萃取条件为：萃取温度为40-60℃，萃取压力为25-42MPa，CO₂流量为20-38L/h，萃取时间为1-3h，分离釜Ⅰ温度为35-45℃，压力为10-18MPa，分离釜Ⅱ温度为25-35℃，压力为6-10MPa。

所述的四氯化碳-甲醇-水比例为18-21：17-20：2-3。

本发明的积极效果在于：

1)方法采用超临界CO₂萃取，提取时间短，效率高， CO₂重复利用，是一种环保无污染的方法；

2)方法采用高速逆流色谱分离，没有产品损失，是一种高效分离方法，制备周期短，试剂可以重复利用，制备量大。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

取1kg奥古斯文殊兰的全株，粉碎，加入pH9的90%乙醇浸润6小时，加入萃取釜中，采用超临界CO₂萃取，调节萃取温度为40℃，萃取压力为38MPa，CO₂流量为38L/h，萃取3h，调节分离釜Ⅰ温度为35℃，压力为10MPa，分离釜Ⅱ温度为25℃，压力为6MPa，在分离釜中收集萃取物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用氨水调节pH至9，收集沉淀物，取四氯化碳、甲醇、水，按（18：18：3）比例混合，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节900r/min，取上相溶解沉淀物注入色谱仪，收集奥古斯碱流分，减压干燥得白色奥古斯碱173mg，高效液相检测，含量98.3%。

实施例2：

取1kg奥古斯文殊兰的全株，粉碎，加入pH12的99%乙醇浸润2小时，加入萃取釜中，采用超临界CO₂萃取，调节萃取温度为60℃，萃取压力为25MPa，CO₂流量为20L/h，萃取1h，调节分离釜Ⅰ温度为45℃，压力为18MPa，分离釜Ⅱ温度为35℃，压力为10MPa，在分离釜中收集萃取物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，滤液用氨水调节pH至8，收集沉淀物，取四氯化碳、甲醇、水，按（18：20：2）比例混合，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节950r/min，取上相溶解沉淀物注入色谱仪，收集奥古斯碱流分，减压干燥得白色奥古斯碱155mg，高效液相检测，含量98.0%。

实施例3：