[发明专利]一种丰花草碱的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物有效成分的提取方法，具体来说是一种丰花草碱的提取方法。

背景技术

丰花草碱（Borrerine），分子式为C₁₆H₂₀ON₂，分子量为240.35，是从茜草科(Rubiaceae)轮生丰花草Borreria verticillata(L.)G.F.W.Meyer地上部分中提取分离的一种咔啉生物碱类化合物。实验研究表明，丰花草碱具有抗微生物活性，对金黄色葡萄球菌和某些肠杆菌有活性；具有细胞毒活性，在3-6μg/ml时有高度细胞毒活性。

目前，国内尚未见丰花草碱的提取纯化方法方面的报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种丰花草碱的提取方法，工艺操作简单，易于实现工业化生产。

为了解决上述技术问题，本发明的目的是这样来实现的：

（1）将轮生丰花草地上部分粉碎，用5-10倍量70-95%的乙醇溶液，25-55℃下进行连续逆流超声提取20-100min，得到乙醇提取液；

（2）上述提取液加入其体积的0.8-1.2%的活性炭40-60℃下保温脱色20-50min，过滤得到脱色液，脱色液浓缩干燥得到粗提物；

（3）上述粗提物采用高速逆流色谱对粗提物进行分离纯化，以氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，紫外在线检测，收集目标流分，浓缩干燥，用丙酮回流溶解，趁热过滤，放冷结晶，滤出结晶干燥即得高纯度丰花草碱产品。

所述步骤（1）中超声频率为40-80KHz。

所述步骤（3）中氯仿-甲醇-水的体积比为9-11:3-5:7-9。

所述步骤（3）中紫外检测波长为226nm。

本发明采用高速逆流色谱法对丰花草碱进行分离纯化，与以往的技术手段相比有明显的优点：分离能力强、时间段、样品损失少，以及分离和纯化同步进行，实现了工业化目的。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

取轮生丰花草地上部分，粉碎，取5kg，从连续逆流超声提取设备头部进料口进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入口加入10倍95%乙醇溶液，55℃下进行连续逆流超声提取20min，超声频率为80KHz，得到提取液，加入其体积的1.2%的活性炭60℃下保温脱色20min，过滤得到脱色液，脱色液浓缩干燥得到粗提物，以体积比为9:3:8氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，将其充分混和，静置分相，两相分别超声波脱气25min，上相为固定相，下相为流动相，将粗提物溶于两相（上相与下相体积比为1:1）混合溶液中，注入高速逆流色谱仪，紫外在线检测，检测波长为226nm，收集目标流分，浓缩干燥，用丙酮回流溶解，趁热过滤，放冷结晶，滤出结晶干燥即得产品1.3g，含量为98.8%。

实施例2：

取轮生丰花草地上部分，粉碎，取5kg，从连续逆流超声提取设备头部进料口进料，从连续逆流超声提取设备尾部溶剂加入口加入6倍70%乙醇溶液，35℃下进行连续逆流超声提取50min，超声频率为50KHz，得到提取液，加入其体积的1%的活性炭50℃下保温脱色30min，过滤得到脱色液，脱色液浓缩干燥得到粗提物，以体积比为9:3:7氯仿-甲醇-水为两相溶剂系统，将其充分混和，静置分相，两相分别超声波脱气25min，上相为固定相，下相为流动相，将粗提物溶于两相（上相与下相体积比为1:1）混合溶液中，注入高速逆流色谱仪，紫外在线检测，检测波长为226nm，收集目标流分，浓缩干燥，用丙酮回流溶解，趁热过滤，放冷结晶，滤出结晶干燥即得产品1.9g，含量为98.5%。

实施例3：