[发明专利]一种银杏内酯的提取分离方法

权利要求书

1.银杏内酯的提取分离方法，其特征在于：步骤如下：

A、提取：粉碎银杏叶，加有机溶剂提取，浓缩提取液中加抗氧化保护剂，用pH调节剂调pH值至4～5，浓缩、冷藏；

其中，步骤A所述提取有机溶剂为乙醇、丙酮或乙酸乙酯，浓度为50～80％v/v，用量为5～12倍量；

B、萃取：将冷藏后的浓缩液先用正己烷或石油醚萃取2～3次；水相用脂溶性溶剂萃取4～5次，再用水饱和仲丁醇-乙酸乙酯混合溶剂或水饱和正丁醇-乙酸乙酯混合溶剂萃取4～5次，合并有机相萃取液，减压浓缩；

C、过柱：将萃取浓缩液过聚酰胺树脂柱，依次用1～5BV水、3～5BV 20％～40％v/v乙醇、2～3BV 60％～90％v/v乙醇洗脱，控制洗脱液流速为2～3BV/h；合并洗脱液；减压浓缩，干燥；

D、析晶：将过柱后的干燥物加入沸水中，搅拌溶解，冷却，上清液用等体积乙酸乙酯、甲酸乙酯或丙酮萃取4～5次，合并萃取液，减压浓缩，蒸干，加5～8倍量30％～50％v/v乙醇加热搅拌溶解，过滤，冷藏，析出晶体，滤过，滤液I备用，晶体用30％～50％v/v乙醇洗涤，减压干燥，得到晶体I；

滤液I浓缩至含醇量为10％～30％v/v，冷藏，析出晶体，滤过，滤液II备用；用30％～50％v/v乙醇洗涤，减压干燥，得晶体II；

浓缩滤液II，加0.1％～0.5％活性炭吸附，过滤，滤液浓缩至含醇量为10％～30％v/v，冷藏，析出晶体，滤过，滤液III备用；晶体用30％～50％v/v乙醇洗涤，减压干燥，得晶体III；

滤液III浓缩，过活性炭-硅胶柱，先用30％～50％v/v乙醇洗脱，再用70％～90％v/v乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩至含醇量为10％～30％v/v，冷藏，析出晶体，滤过，滤液IV备用；晶体用30％v/v乙醇洗涤，减压干燥，得晶体IV；

滤液IV浓缩，冷藏，析出晶体，滤过，晶体用30％v/v乙醇洗涤，减压干燥，得晶体V；

E、混晶：将晶体I、II、III、IV、V混合均匀，粉碎，即得银杏内酯。

2.根据权利要求1所述的银杏内酯的提取分离方法，其特征在于：步骤A所述提取的方式为回流提取或煎煮提取。

3.根据权利要求2所述的银杏内酯的提取分离方法，其特征在于：所述回流提取采用乙醇、丙酮或乙酸乙酯提取，其中，不同提取溶剂的浓度及提取条件如下：

乙醇：浓度为50％～80％v/v，提取温度75～85℃，提取次数2～3次，时间每次1～2小时；

丙酮：浓度为50％～80％v/v，提取温度45～55℃，提取次数2～3次，时间每次1～2小时；

乙酸乙酯：浓度为50％～80％v/v，提取温度55～65℃，提取次数2～3次，时间每次1～2小时；

进一步，优选提取条件为：提取3次，每次1.5小时；乙醇浓度65％v/v；丙酮浓度50％v/v；乙酸乙酯浓度60％v/v。

4.根据权利要求2所述的银杏内酯的提取分离方法，其特征在于：所述煎煮提取采用乙醇、丙酮或乙酸乙酯提取，其中，不同提取溶剂的浓度及提取条件如下：

乙醇：浓度为50％～80％v/v，提取温度80～90℃，提取次数2～3次，时间每次1～2小时；

丙酮：浓度为50％～80％v/v，提取温度50～60℃，提取次数2～3次，时间每次1～2小时；

乙酸乙酯：浓度为50％～80％v/v，提取温度60～65℃，提取次数2～3次，时间每次1～2小时；

进一步，优选提取条件为：提取3次，每次1.5小时；乙醇浓度65％v/v；丙酮浓度50％v/v；乙酸乙酯浓度60％v/v。

5.根据权利要求1所述的银杏内酯的提取分离方法，其特征在于：步骤A所述抗氧化保护剂为中性氨基酸；

进一步，抗氧化保护剂优选丝氨酸、蛋氨酸、天冬酰胺或苏氨酸中的至少一种；

进一步，抗氧化保护剂最优选蛋氨酸。

6.根据权利要求1所述的银杏内酯的提取分离方法，其特征在于：步骤A所述pH调节剂为有机弱酸；

进一步，pH调节剂优选枸橼酸、苹果酸或山梨酸中的至少一种；

进一步，pH调节剂最优选枸橼酸。

7.根据权利要求1所述的银杏内酯的提取分离方法，其特征在于：步骤B所述脂溶性溶剂为乙酸乙酯、甲酸乙酯、丙酮、丁酮中的至少一种。