[发明专利]一种组胺修饰的胍基丁胺基线性聚合物转基因载体及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种组胺修饰的胍基丁胺基线性聚合物转基因载体，其特征在于，以聚甲基丙烯酸缩水甘油酯为主链，取代基为胍基丁胺与组胺，其分子式结构如下：

其中两种重度单元的聚合度m和n由投料时两种单体的摩尔决定。

2.根据权利要求1所述的一种组胺修饰的胍基丁胺基线性聚合物转基因载体，其特征在于，两种重度单元的聚合度m∶n为(1-3)∶(3-1)。

3.根据权利要求1所述的一种组胺修饰的胍基丁胺基线性聚合物转基因载体，其特征在于，两种重度单元的聚合度m∶n为1∶3、2∶2或者3∶1。

4.一种制备如权利要求1所述的线性聚合物转基因载体的方法，其特征在于，按照下述步骤进行：将胍基丁胺、组胺和甲基丙烯酸缩水甘油酯在碱性的条件下进行非均相反应，使得甲基丙烯酸缩水甘油酯的环氧基打开进而与胍基丁胺和组胺的末端氨基反应，反应完全后，用乙醚萃取除去未反应的甲基丙烯酸缩水甘油酯；最后在酸性、无氧惰性气体保护的条件下，以过硫酸铵为引发剂，引发经胍基丁胺和组胺改性的甲基丙烯酸缩水甘油酯单体进行自由基无规聚合，最终经透析冻干即得组胺修饰的线性胍基丁胺转基因载体。

5.根据权利要求4所述的制备线性聚合物转基因载体的方法，其特征在于，所述无氧惰性气体为氮气、氩气或者氦气。

6.根据权利要求4所述的制备线性聚合物转基因载体的方法，其特征在于，将胍基丁胺、组胺和甲基丙烯酸缩水甘油酯混合非均相反应时，一般在pH＝9-10、温度为35℃的条件下反应至少24小时，优选24-48小时，可通过进一步延长反应时间来提高反应效果；胍基丁胺与组胺的总用量应大于甲基丙烯酸缩水甘油酯，以保证甲基丙烯酸缩水甘油酯的环氧基尽量全部参与反应。

7.根据权利要求4所述的制备线性聚合物转基因载体的方法，其特征在于，无规聚合反应应在pH＝4-5、温度为65℃的无氧氮气保护条件下反应至少24小时，优选24-48小时，可通过进一步延长反应时间来提高反应效果。

8.根据权利要求4所述的制备线性聚合物转基因载体的方法，其特征在于，聚合反应结束后，将产物通过透析方法进行提纯，使用透析袋的截留分子量3500，在去离子水中透析，8小时换一次水，透析5天后冻干即得组胺修饰的胍基丁胺基线性聚合物转基因载体。

9.如权利要求1所述的线性聚合物转基因载体在基因转染领域的应用，用于非病毒转基因载体，实现对DNA的安全高效运输。