[发明专利]载蛋白质类药物的PLGA复合微球及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种载蛋白质类药物的聚乳酸-羟乙酸共聚物(PLGA)复合微球及其制备方法，属于生物医用高分子材料与生物活性药物控释制剂的交叉研究领域。

背景技术

近年来，随着基因工程重组技术和蛋白组学的发展，多肽和蛋白质类药物已成为目前医药研发领域中最活跃，进展最快的部分，众多新型多肽、蛋白类药物在治疗艾滋病、癌症、肝炎、糖尿病、慢性疼痛等疾病效果显著，另外在诊断以及疫苗预防疾病等方面也发挥着重要的作用。由于该类药物体内外不稳定性，临床上主要的剂型是溶液型注射剂和冻干粉针。注射给药后，药物很快就被清除或降解，为了达到疗效常常需要频繁、大剂量及长时间给药，导致毒副作用及耐受性的产生，严重限制了其在临床上的应用。

近年来，人们对于多肽、蛋白类药物长效剂型的研究越来越多，采用可降解材料将药物包封而成的缓释肌注微球制剂发展很快。国内外科学家在研制缓释微球制剂时，使用最多的生物降解高分子材料是PLGA，因其具有良好的生物降解性、相容性和可吸收性，已被FDA批准为药用辅料。目前已有肌注微球生产上市，用于治疗一些激素依赖性疾病，如促黄体激素释放激素、亮丙瑞林等聚乳酸缓释微球，而国内只上市了小分子肽类——亮丙瑞林的肌注微球仿制剂。总体而言，肌注微球的上市品种少，不能满足临床需求，另外还没有成熟的制备工艺可广泛应用于多肽、蛋白微球的给药体系。

目前国内外学者制备多肽及蛋白类药物微球的方法较多，如溶剂挥发法、喷雾冷冻干燥法、相分离法、喷雾干燥法等，但都存在一些不足。最常用的制备工艺为溶剂挥发法，该法制得的微球包封率较好、药物易于释放，但药物突释现象明显、呈现出两相释放即后期只能维持很低的血药浓度水平难以满足治疗需求。

发明内容

本发明的目的在于提出一种载蛋白质类药物的PLGA复合微球的制备方法，该方法制备的复合微球药物突释低，药物作用时间延长。

实现上述目的的技术方案如下：

一种载蛋白质类药物PLGA复合微球的制备方法，包括以下步骤：

(1)PLGA溶液的配制

将PLGA溶解于有机溶液中形成有机相，PLGA的浓度为10％～25％(g/ml)；

(2)含蛋白质类药物的海藻酸钠溶液的配制

将蛋白质类药物溶解于含稳定剂的海藻酸钠溶液中形成内水相，蛋白质类药物的浓度为0.5％～10％(g/ml)，稳定剂的浓度为0.1％～5％(g/ml)；海藻酸钠的浓度为0.1％～5％(g/ml)；

(3)初乳的制备

将内水相注射进有机相中形成初乳(W/O)，有机相与内水相的体积比为4∶1～50∶1；

(4)复乳的制备

把初乳在搅拌的情况下加到外水相1中，乳化形成复乳(W/O/W)；所述外水相1为含一定浓度乳化剂的CaCl₂水溶液，初乳与外水相1的体积比为1∶10～1∶100；乳化剂的浓度为0.2％～5％(g/ml)，CaCl₂浓度为0.1％～10％(g/ml)；

(5)微球的形成

将复乳溶液转移到外水相2中，低速搅拌至有机溶剂挥发完全，离心、洗涤后收集微球；所述外水相2为CaCl₂溶液或含乳化剂的CaCl₂溶液，其中，CaCl₂浓度为0.1％～10％(g/ml)，乳化剂浓度为0.05％～5％(g/ml)，外水相2的体积为复乳的0.8～8倍；

(6)冷冻干燥，即得载蛋白质类药物的PLGA复合微球。

本发明的PLGA复合微球制备方法，是采用改良复乳-溶剂挥发法。将PLGA溶于有机溶媒中；将冻干的重组人干扰素或牛血清白蛋白等蛋白药物溶解于含稳定剂的海藻酸钠溶液中形成内水相；再将内水相注射进有机相中，搅拌乳化成初乳(W/O)；然后将初乳在搅拌的条件下加到含乳化剂的氯化钙水溶液(外水相1)中，乳化成复乳(W/O/W)；再在大体积的氯化钙或含乳化剂的氯化钙溶液(外水相2)中低速搅拌，使有机溶剂挥发完全；离心、洗涤、收集微球，冷冻干燥即得PLGA复合微球粉末。

在其中一个实施例中，所述蛋白质类药物为重组人干扰素-α。

在其中一个实施例中，所述蛋白质类药物为牛血清白蛋白。

在其中一个实施例中，步骤(1)中，PLGA的浓度为15％～20％(g/ml)。

在其中一个实施例中，步骤(2)中，蛋白质类药物的浓度为1％～5％(g/ml)，稳定剂的浓度为0.5％～2.5％(g/ml)；海藻酸钠的浓度为0.5％～2.0％(g/ml)。