[发明专利]超临界流体萃取蜡杨梅酸A的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药化学技术领域，涉及一种超临界流体萃取蜡杨梅酸A的方法。

背景技术

蜡杨梅酸A（Myriceric acid A）分子式为C₃₉H₅₂O₇，分子量为632.84。无色片状结晶（甲醇-水8:2），mp.211-213℃。是从杨梅科植物蜡杨梅Myrica cerifera L.小枝中分离得到一种三萜类化合物。药理研究表明，蜡杨梅酸A具有内皮素受体（ETA）拮抗活性，在大鼠主动脉平滑肌细胞（A7r5）中，抑制内皮素与A7r5的结合，IC₅₀为0.04μg/mL；抑制内皮素诱导的Ca²⁺移动的IC₅₀为0.0075μg/mL。

现有技术中，尚未见制备蜡杨梅酸A的生产工艺报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种超临界流体萃取蜡杨梅酸A的方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

超临界流体萃取蜡杨梅酸A的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）将蜡杨梅药材粉碎成粗粉，投入萃取釜中进行超临界流体萃取，向萃取罐内泵入CO₂和夹带剂乙醇，萃取压力为25-45MPa，萃取温度为35-50℃，提取时间2-4小时，解析压力为4-9MPa，解析温度为30-45℃，收集萃取物；

（2）将所得萃取物加入中压硅胶柱层析纯化，乙酸乙酯-乙醇洗脱，收集蜡杨梅酸A流分，减压浓缩，冷却析晶，得粗晶；

（3）将粗晶用二氯甲烷-甲醇重结晶得到蜡杨梅酸A。

所述步骤（1）中夹带剂乙醇的体积百分比浓度为60-85%。

所述步骤（2）中压硅胶柱层析，硅胶目数为200-300目，柱压为1-3MPa，柱内径为50-200mm，层析柱径高比为1：5-18。

本发明的有益效果是：本发明工艺步骤少，耗时短，得率高，易规模化生产；采用中压层析柱，上样量大，生产周期短，分离度好，产品纯度高。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

称取蜡杨梅药材1000g粉碎成粗粉，投入到超临界萃取釜中，以CO₂为溶剂，设定萃取柱温度为35℃、压力为25MPa，分离器的温度为30℃、压力为5MPa，CO₂流量为18L/h，夹带剂加入体积分数75%的乙醇溶液，萃取时间为2h，收集萃取物。称取经活化的200-300目的硅胶装入不锈钢层析柱中（内径100mm，径高比为1:12），将萃取物用甲醇超声使完全溶解，加入层析柱中，用乙酸乙酯-乙醇（15:1）洗脱，收集蜡杨梅酸A流分，减压浓缩，冷却析晶，过滤得粗晶，再用二氯甲烷-甲醇重结晶，滤出晶体，干燥得成品，蜡杨梅酸A含量为90.4%。

实施例2：

称取蜡杨梅药材1000g粉碎成粗粉，投入到超临界萃取釜中，以CO₂为溶剂，设定萃取柱温度为42℃、压力为37MPa，分离器的温度为36℃、压力为6MPa，CO₂流量为20L/h，夹带剂加入体积分数85%的乙醇溶液，萃取时间为3h，收集萃取物。称取经活化的200-300目的硅胶装入不锈钢层析柱中（内径50mm，径高比为1:5），将萃取物用甲醇超声使完全溶解，加入层析柱中，用乙酸乙酯-乙醇（15:1）洗脱，收集蜡杨梅酸A流分，减压浓缩，冷却析晶，过滤得粗晶，再用二氯甲烷-甲醇重结晶，滤出晶体，干燥得成品，蜡杨梅酸A含量为90.9%。

实施例3：

称取蜡杨梅药材2000g粉碎成粗粉，投入到超临界萃取釜中，以CO₂为溶剂，设定萃取柱温度为50℃、压力为45MPa，分离器的温度为40℃、压力为8MPa，CO₂流量为22L/h，夹带剂加入体积分数80%的乙醇溶液，萃取时间为2.5h，收集萃取物。称取经活化的200-300目的硅胶装入不锈钢层析柱中（内径150mm，径高比为1:18），将萃取物用甲醇超声使完全溶解，加入层析柱中，用乙酸乙酯-乙醇（15:1）洗脱，收集蜡杨梅酸A流分，减压浓缩，冷却析晶，过滤得粗晶，再用二氯甲烷-甲醇重结晶，滤出晶体，干燥得成品，蜡杨梅酸A含量为92.3%。

实施例4：

称取蜡杨梅药材5000g粉碎成粗粉，投入到超临界萃取釜中，以CO₂为溶剂，设定萃取柱温度为47℃、压力为41MPa，分离器的温度为45℃、压力为7MPa，CO₂流量为15L/h，夹带剂加入体积分数60%的乙醇溶液，萃取时间为1.5h，收集萃取物。称取经活化的200-300目的硅胶装入不锈钢层析柱中（内径200mm，径高比为1:15），将萃取物用甲醇超声使完全溶解，加入层析柱中，用乙酸乙酯-乙醇（15:1）洗脱，收集蜡杨梅酸A流分，减压浓缩，冷却析晶，过滤得粗晶，再用二氯甲烷-甲醇重结晶，滤出晶体，干燥得成品，蜡杨梅酸A含量为91.6%。