[发明专利]一种检测参芪扶正注射液中大分子物质的方法

权利要求书

1.一种检验参芪扶正注射液大分子物质的方法，该方法包括如下步骤：

(1)采用超滤离心法对中药注射注射液超滤离心处理，并在超滤离心后的上层截留液部分加入超纯水，混匀后离心，直至洗出部分用Molish反应检测呈阴性，收集上层截留液；

(2)采用BCA法和Molish法检测步骤(1)获得的上层截留液，以确定所述中药注射注射液否存在大分子物质。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，使用的超滤离心管优选为Millipore Ultra-153.0KD-3.8KD。

3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，每次超滤离心后的上层截留液体积为150μl-250μl。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，加入超纯水的次数优选为8-10次。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述大分子物质是指参芪扶正注射液中的大分子蛋白和大分子多糖。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：

(1)精密吸取参芪扶正注射液10ml置于Millipore Ultra-153.0KD-3.8KD超滤离心管中，5000转离心至上层截留液剩余体积为150μl-250μl，往上层截留液加入超纯水5ml，用移液枪吹打混匀后，再次离心至上层截留液剩余体积为150μl-250μl，重复加水8～10次，每次2ml，每次加水后都要充分混匀再离心，直至下层洗出部分用Molish反应检测阴性，收集上层截留液，定容至10ml；

(2)采用BCA法检测注射注射液否含有大分子的蛋白质，具体方法为：使用BCA蛋白试剂盒，于96孔板中加入20μl样品液及200μlBCA工作液，37℃放置30min，观察是否有紫色络合物出现；采用Molish法检测注射注射液否含有大分子的多糖物质，具体方法为：小试管中加入1ml样品液和两三滴Molish试液，摇匀，沿管壁慢慢加入1ml浓硫酸，观察两层液面交界处是否有紫色环的出现。