[发明专利]用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌及其应用方法

权利要求书

1.一种用于制备L-乳酸的凝结芽孢杆菌，所述的凝结芽孢杆菌(Bacillus eoagulans)为革兰氏阳性菌，其特征在于：所述的革兰氏阳性菌为凝结芽孢杆菌XZL9，保藏号为DSM No.23184，其16S rRNA基因的核苷酸序列如Seq.ID No.2所示。

2.一种用权利要求1所述的凝结芽孢杆菌制备L-乳酸的方法，其特征在于：首先对凝结芽孢杆菌进行种子培养获得种子培养液，然后以含有五碳糖或六碳糖或其组合的农业和工业产品和废弃物作为发酵培养基的碳源，对凝结芽孢杆菌的种子培养液进行发酵后得到L-乳酸。

3.根据权利要求2所述的用凝结芽孢杆菌制备L-乳酸的方法，其特征在于：所述的发酵是指采用发酵培养基按10％体积比的接种量接入种子培养液，在50℃-60℃环境下培养48-72小时。

4.根据权利要求3所述的用凝结芽孢杆菌制备L-乳酸的方法，其特征在于：所述的发酵中包含补料流加工艺，该补料流加工艺是指：当发酵液中总还原糖含量低于30g/L时补加碳源，使总还原糖含量达到50～70g/L。

5.根据权利要求3所述的用凝结芽孢杆菌制备L-乳酸的方法，其特征在于，所述的发酵培养基的组份及其含量为：碳源40～200g/L、氮源5～10g/L和用于控制培养基pH的碳酸钙50～100g/L，余量为水。

6.根据权利要求5所述的用凝结芽孢杆菌制备L-乳酸的方法，其特征在于，所述的碳源为五碳糖或六碳糖或富含五碳糖或六碳糖的原料，为以下三种中的任意一种：

(1)葡萄糖，浓度为40～150g/L；

(2)木糖，浓度为40～100g/L；

(3)木糖醇生产副产物，浓度为100～200g/L；

所述的木糖醇生产副产物含有50％-70％的碳水化合物，其中的葡萄糖含量为5％-10％w/v，木糖含量为40％-50％w/v，阿拉伯糖含量为5％-10％w/v。

7.根据权利要求2所述的用凝结芽孢杆菌制备L-乳酸的方法，其特征在于，所述的凝结芽孢杆菌的种子培养液是指：将凝结芽孢杆菌XZL9进行斜面培养和种子培养后获得的培养物。

8.根据权利要求7所述的用凝结芽孢杆菌制备L-乳酸的方法，其特征在于，所述的斜面培养是指：将凝结芽孢杆菌XZL9菌种接种于含有15g/L琼脂的固体斜面培养基上，50-60℃条件下，培养24-48小时。

9.根据权利要求7所述的用凝结芽孢杆菌制备L-乳酸的方法，其特征在于，所述的种子培养是指：将经过斜面培养的凝结芽孢杆菌在无菌条件下接种到30ml种子培养基中，50-60℃条件下，静止培养10-24小时，加入碳酸钙控制发酵液pH，制得种子培养液。

10.根据权利要求9所述的用凝结芽孢杆菌制备L-乳酸的方法，其特征在于，所述的种子培养基每升中含有：葡萄糖40-60g，酵母粉5-10g，碳酸钙20-40g，余量为水；该种子培养基的pH为6.5。