[发明专利]兔源性纤维成分荧光定量PCR定性检测方法有效
申请号: | 201210114158.2 | 申请日: | 2012-04-18 |
公开(公告)号: | CN102634584A | 公开(公告)日: | 2012-08-15 |
发明(设计)人: | 杨娟;费静;唐敏峰;陆维明;王小平;叶尚华;高友军;刘锦瑞 | 申请(专利权)人: | 上海出入境检验检疫局工业品与原材料检测技术中心;中华人民共和国新疆出入境检验检疫局;河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 上海华工专利事务所 31104 | 代理人: | 应云平 |
地址: | 200135 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 兔源性 纤维 成分 荧光 定量 pcr 定性 检测 方法 | ||
1.一种兔源性纤维成分荧光定量PCR的定性检测方法,包括以下步骤:
步骤一、以兔毛的DNA为模板,进行PCR扩增;
步骤二、检测扩增产物的荧光信号;
其特征在于,用于PCR扩增的反应体系中含有扩增兔源性纤维成分特异性引物对和兔源性纤维成分特异性探针。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述扩增兔源性纤维成分特异性引物对的序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述兔源性纤维成分特异性探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述PCR扩增的条件如下:
反应体系:ABI Taqman universal PCR master mix(2×)10μl,DNA模板2μl,引物1.2μl(10μM),probe 2μl(2μM),ddH2O 4.8μl;
反应的条件为:95℃,5min;95℃,15s,61℃,45s,40个循环。
5.一种兔源性纤维成分的检测试剂盒,含有以下试剂:
(a)扩增兔源性纤维成分特异性引物对;
(b)兔源性纤维成分特异性探针。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括:
(c)标准参照物。
7.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述扩增兔源性纤维成分特异性引物对的序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。
8.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述兔源性纤维成分特异性探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
9.如权利要求5~8中任一项的试剂盒的应用,用于检测在皮草中是否存在兔源性纤维成分。
10.一种如权利要求1所述的兔源性纤维成分荧光定量PCR的特异性引物和特异性探针,其特征在于,
所述兔源性纤维成分特异性引物的序列如SEQ ID NO:1和SEQ IDNO:2所示;
所述兔源性纤维成分特异性探针的序列如SEQ ID NO:3所示。
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