[发明专利]一种用发光细菌对抗生素类物质毒性进行检测的方法

权利要求书

1.一种用发光细菌对抗生素类物质毒性进行检测的方法，包括如下步骤；

1)配制抗生素母液并将母液稀释至实验所需浓度；

2)制备发光细菌冻干粉复苏液；

3)空白对照制备：对于溶解性的抗生素，将发光细菌复苏液作为空白对照；对于不溶或微溶性的抗生素，将含有与对应待测样品具有相同含量二甲基亚砜的复苏液作为空白对照；

4)待测样品溶液制备：取不同浓度的待测样品加入到干净的测试管中，摇匀；

5)将空白对照和待测样品相间放置于测试架上；

6)按顺序向各个测试管中加入复苏的发光细菌冻干粉(根据发光量和仪器要求调节加入量)，两管加入时间相隔15-30s，轻轻振荡，使之均匀，

7)EC50值的计算：以待测样品浓度的对数为横坐标，对应的相对发光率为纵坐标作图，求得其EC50值，即相对发光率在50％的样品的浓度；

其特征在于，所述步骤6)的放置后，向各个管中按比例依次加入发光细菌的完全培养基，使抗生素类物质与发光细菌作用时间延长至12-36h后在水质毒性检测仪测定发光量。

2.根据权利要求1所述的一种用发光细菌对抗生素类物质毒性进行检测的方法，其特征在于，所述抗生素类物质与发光细菌作用时间延长至24个小时。

3.根据权利要求1所述的发光细菌检测抗生素类物质毒性的改进方法，其特征在于，抗生素类物质与发光细菌在20-25℃条件下培养。

4.根据权利要求1所述的用发光细菌对抗生素类物质毒性进行检测的方法，其特征在于，所述抗生素类物质包括青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、氯霉素类、林可酰胺类。

5.根据权利要求1所述的用发光细菌对抗生素类物质毒性进行检测的方法，其特征在于，所述抗生素类物质为四环素类和磺胺类抗生素。

6.根据权利要求5所述的用发光细菌对抗生素类物质毒性进行检测的方法，其特征在于，所述四环素类抗生素，具体包括四环素CTC、土霉素OTC、金霉素TC、强力霉素。

7.根据权利要求1所述的用发光细菌对抗生素类物质毒性进行检测的方法，其特征在于，所述的抗生素类物质为不溶或微溶物质时，在配置的抗生素类母液中加入二甲基亚砜，加入量不超过总体积的千分之一。

8.根据权利要求7所述的用发光细菌对抗生素类物质毒性进行检测的方法，其特征在于，所述的不溶或微溶抗生素类物质是磺胺类抗生素。

9.根据权利要求5或8所述的用发光细菌对抗生素类物质毒性进行检测的方法，其特征在于，所述的磺胺类抗生素为磺胺嘧啶SD、磺胺甲基嘧啶SM、磺胺甲恶唑SMZ。