[发明专利]携带O型口蹄疫病毒B细胞表位的VP60蛋白重组杆状病毒有效
申请号: | 201210111344.0 | 申请日: | 2012-04-17 |
公开(公告)号: | CN102604898A | 公开(公告)日: | 2012-07-25 |
发明(设计)人: | 王芳;盛蓉;范志宇;胡波;魏后军;薛家兵;姜平 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;C07K19/00;A61K39/135;A61P31/14;G01N33/569 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 张素卿 |
地址: | 210014 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 携带 口蹄疫病毒 细胞 vp60 蛋白 重组 杆状病毒 | ||
1.携带O型口蹄疫病毒B细胞表位的兔出血症病毒衣壳蛋白VP60重组杆状病毒,是由以下方法构建而成的:以质粒pFastBacTM1-VP60为模板,PCR扩增出兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因片段,将其克隆入转移载体,再将口蹄疫病毒FMDV VP1 B细胞表位200~213aa插入VP60基因片段中,然后将重组质粒转化含有穿梭载体Bacmid的E. coli DH10Bac 感受态细胞,再转染Sf9细胞,获得携带O型口蹄疫病毒B细胞表位的兔出血症病毒衣壳蛋白VP60重组杆状病毒rAcV-Bac-NF。
2.用权利要求1所述重组杆状病毒制备的携带O型口蹄疫病毒B细胞表位的兔出血症病毒样粒子嵌合蛋白。
3.用权利要求1所述重组杆状病毒制备的携带O型口蹄疫病毒B细胞表位的兔出血症病毒样粒子嵌合蛋白的方法,特征在于:将权利要求1所述重组杆状病毒接种于Sf9细胞,收获细胞培养物,即为携带O型口蹄疫病毒B细胞表位的兔出血症病毒样粒子嵌合蛋白。
4.权利要求1所述重组杆状病毒在制备预防、诊断或治疗口蹄疫药物中的用途。
5.权利要求2或3所述携带O型口蹄疫病毒B细胞表位的兔出血症病毒样粒子嵌合蛋白在制备预防、诊断或治疗口蹄疫药物中的用途。
6.用权利要求1所述重组杆状病毒制备的携带口蹄疫病毒B细胞表位的兔出血症病毒衣壳蛋白病毒样粒子疫苗。
7.用权利要求1所述重组杆状病毒制备疫苗的方法,特征在于:培养Sf9细胞至对数生长期,接种权利要求1所述重组杆状病毒,等细胞有病变后5天收毒,用PH 7.4灭菌磷酸盐缓冲溶液PBS重悬,按抗原:弗氏佐剂体积1:1比例加入佐剂,混匀,即为携带口蹄疫病毒B细胞表位的兔出血症病毒衣壳蛋白病毒样粒子疫苗。
8.用红细胞凝集试验测定权利要求2或3所述携带O型口蹄疫病毒B细胞表位的兔出血症病毒样粒子嵌合蛋白抗原血凝效价的方法。
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