[发明专利]有机-无机杂化蛋白质分子印迹毛细管整体柱无效
申请号: | 201210110319.0 | 申请日: | 2012-04-16 |
公开(公告)号: | CN102626609A | 公开(公告)日: | 2012-08-08 |
发明(设计)人: | 林子俺;林瑶;杨黄浩;张兰;陈国南 | 申请(专利权)人: | 福州大学 |
主分类号: | B01J20/26 | 分类号: | B01J20/26;B01J20/281;B01J20/30;C07K1/14 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350108 福建省福州市*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 有机 无机 蛋白质 分子 印迹 毛细管 整体 | ||
1.一种有机-无机杂化蛋白质分子印迹毛细管整体柱的制备方法,其特征在于:所述方法包括如下步骤:
1)将硅烷前驱体、分散剂以及催化剂混合,于冰水浴下剧烈搅拌至透明粘稠状;
2)将有机功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂和模板蛋白混合,于0~4℃下超声至完全溶解后加入步骤1)的透明粘稠液,于0~4℃下超声至混合均匀,将混合液注入经乙烯基改性的石英毛细管内,密封后置于水浴锅内,于35~45℃和50~60℃下分别加热8~24小时完成聚合反应,再用十二烷基磺酸钠和乙酸的混合溶液冲洗制得所述的有机-无机杂化蛋白质分子印迹毛细管整体柱。
2.根据权利要求1所述的有机-无机杂化蛋白质分子印迹毛细管整体柱的制备方法,其特征在于:步骤1)中,所述硅烷前驱体为四甲氧基硅烷和四乙氧基硅烷中的一种以及乙烯基三甲氧基硅烷和乙烯基三乙氧基硅烷中的一种的混合物,或四甲氧基硅烷和四乙氧基硅烷中的一种以及3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷和3-(甲基丙烯酰氧)丙基三乙氧基硅烷中的一种的混合物,混合物中两者的体积比为9-3:1;分散剂为聚乙二醇10000,用量为硅烷前驱体质量的20%-35%;催化剂为0.01mol/L乙酸溶液,催化剂与硅烷前驱体的体积比为4-1:1;
步骤2)中,所述有机功能单体为丙烯酰胺;交联剂为N,N'-亚甲基双丙烯酰胺;致孔剂为甲醇或甲醇和水的混合物;引发剂为偶氮二异丁腈;模板蛋白为溶菌酶、核糖核酸酶A或辣根过氧化物酶;甲醇与水的质量比为30-80:0-50;有机功能单体、交联剂、致孔剂和引发剂的质量比为7-29:0.9-3.9:40-160:0.2-1.0;有机功能单体与模板蛋白的摩尔比为2000-10000:1;有机功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂和模板蛋白的总质量占透明粘稠液质量的32%-38%。
3.根据权利要求1所述的有机-无机杂化蛋白质分子印迹毛细管整体柱的制备方法,其特征在于:步骤2)中,反应温度分别优选40℃和60℃;反应时间各优选12小时。
4.根据权利要求2所述的有机-无机杂化蛋白质分子印迹毛细管整体柱的制备方法,其特征在于:所述硅烷前驱体混合物中两者的体积比优选为5-6:1;分散剂的用量优选为硅烷前驱体质量的25%-30%;所述催化剂与硅烷前驱体的体积比优选为2-3:1;所述有机功能单体、交联剂、致孔剂和引发剂的质量比优选为14-20:2-3:80:0.7,功能单体与模板蛋白的摩尔比优选为4000-6000;甲醇与水的比例优选为5:3,有机功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂和模板蛋白的总质量占透明粘稠液质量的34%。
5.根据权利要求1所述的有机-无机杂化蛋白质分子印迹毛细管整体柱的制备方法,其特征在于:所述步骤2)中,十二烷基磺酸钠和乙酸的混合溶液中的十二烷基磺酸钠的重量浓度为2-10%,乙酸的体积浓度为0.05-0.1%。
6.一种如权利要求1所述的制备方法制得的有机-无机杂化蛋白质分子印迹毛细管整体柱。
7.一种如权利要求1所述的制备方法制得的有机-无机杂化蛋白质分子印迹毛细管整体柱用于选择性分离模板蛋白质。
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