[发明专利]抗人大肠癌干细胞相关蛋白LYRM2的单克隆抗体及应用

权利要求书

1.一种抗人LYRM2蛋白单克隆抗体，由保藏号为CCTCC No：C 201212的杂交瘤细胞株D0F8分泌产生。

2.如权利要求1所述的单克隆抗体的制备方法，所述方法包括：

(1)将核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的人LYRM2基因插入原核表达载体pET-43.1b(+)中，构建重组载体，并将重组载体转化到宿主细菌E.coli.BL21(DE3)中，以含AMP 50μg/mL的LB培养基于37℃下培养3h后，筛选阳性克隆添加终浓度1mmol/L的IPTG于37℃下诱导3h，分离纯化诱导液获得可溶性LYRM2融合蛋白，利用肠激酶酶切纯化即得氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的可溶性LYRM2蛋白；

(2)用可溶性LYRM2蛋白免疫BALB/c小鼠，取免疫后的BALB/c小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合；

(3)筛选融合后的细胞，获得可分泌抗人LYRM2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞，即得抗人LYRM2蛋白单克隆抗体。

3.如权利要求1所述的单克隆抗体在制备人LYRM2表达情况的免疫检测试剂盒中的应用。

4.杂交瘤细胞株D0F8，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，邮编430074，保藏编号：CCTCC No：C 201212，保藏日期：2012年2月22日。