[发明专利]抗着丝粒抗体自身抗原及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物标志物领域，具体涉及抗着丝粒抗体自身抗原及其应用。

背景技术

抗着丝粒抗体(anticentromere antibody，ACA)是指一类识别存在于着丝粒区域的蛋白质抗原的抗体。目前已知CENP-B、CENP-A和CENP-C是ACA的三种主要自身抗原。ACA是一些自身免疫性疾病诊断的生物标记物，特别是对于局限性硬皮病(limited cutaneous systemic sclerosis，lcSSc)的诊断具有重要意义。同时，ACA对于细胞生物学家探索和理解高度有序的染色体结构和细胞分裂的调节机理是一把利器。

ACA首次被发现是在1980年(Fritzler MJ，1980)，Fritzler等利用间接免疫荧光技术发现CREST综合征患者血清中存在可以特异性识别使细胞着丝点区域的自身抗体。目前间接免疫荧光法是最常用的检测ACA的检测方法之一，其使用的抗原基质为快速分裂的组织培养细胞系，如Hep-2细胞(人喉表皮样癌细胞)等。典型的ACA免疫荧光图谱是在分裂间期的细胞中呈现散在颗粒状荧光，而在分裂中期的细胞中呈现聚集在细胞平板上的姐妹染色单体配对点状荧光。

目前发现的ACA的主要抗原为CENP-B，CENP-A和CENP-C。由于大部分ACA阳性血清均可以识别重组CENP-B的C端和CENP-A的N端，故临床上常用的检测ACA的方法还包括使用重组的CENP-B和CENP-A进行ELISA检测和/或Western blot检测，可以大大提高灵敏度(Mahler，M.，D，2011)。也有报道称基于合成的CENP-A抗原表位多肽的ELISA检测结果也比较好(Mahler，M.，L，2010)。

ACA是公认的系统性硬皮病诊断和预后判断的重要生物标记物。虽然ACA亦在多种其他疾病患者的血清中出现过，但关于ACA对其他疾病的诊断和预后价值研究的比较少或者争议较多。

着丝粒是一个高度复杂的结构，尽管着丝粒的具体分子结构尚不是很清楚，但已知有很多着丝粒蛋白质或蛋白质复合体参与了着丝粒的构建并且在其中发挥重要作用，例如CENP-A是一种着丝粒特异性的组蛋白，细胞分裂期间CENP-A与其他蛋白质组成一个致密的颗粒状结构动粒，在细胞分裂过程中牵拉复制染色体发生分离。研究显示动粒中含有两个非常保守的蛋白质-蛋白质相互作用的网络，一个是已知的KMN(KNL1/MIND/NDC80)复合体网络，另一个是最近发现的CENP-A-NAC/CENP-A-CAD复合体网络。其中CENP-A-NAC(CENP-A Nucleosome Associated Complex)复合体至少包含CENP-A、CENP-C、CENP-H、CENP-M、CENP-N、CENP-T和MLF1IP/CENP-U等着丝粒蛋白质。CENP-A-CAD(CENP-A Nucleosome Distal Proteins)复合体至少包含CENP-I、CENP-K、CENP-L、CENP-O、CENP-P、CENP-Q、CENP-R和CENP-S等着丝粒蛋白质。CENP-A-NAC复合体与CENP-A-CAD复合体相互作用参与动粒蛋白质的组装、染色体的分离及有丝分裂的进行(Okada，M.，I.M，2006)。

随着着丝粒结构的解析和成分的鉴定，人们发现原来越多的着丝粒蛋白质成为ACA的靶标抗原。除了CENP-B，CENP-A和CENP-C外，其他CENP-自身抗原还包括在SSc血清中被发现或鉴定到的CENP-D(Kingwell B，1987，Ford AL，1998)，CENP-E(Rattner JB，1996)，和CENP-O(Saito，A，2009)以及在其他自身免疫性疾病中被发现或鉴定到的CENP-F(Rattner JB，1993)，CENP-G(He D，1998)，和CENP-H(Sugata N，1999，Hsu，T.C.2006)。目前只有CENP-B、CENP-A和CENP-C已经成功应用于临床，其他的自身抗体多数仅用于细胞生物学研究或者实验室阶段疾病相关研究。

对于组成着丝粒复杂结构的其他相关蛋白质是否也是ACA的自身抗原及其与临床症状和疾病治疗以及预后的关系等则不得而知，特别是在SSc血清中的特征及其与SSc临床症状之间的关系。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供抗着丝粒抗体自身抗原及其应用。