[发明专利]分子miR-150在筛选制备检测大肠癌药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及药物化学，具体涉及生物标志物分子miR-150在筛选制备检测大肠癌药物中的应用。

背景技术

大肠癌是常见恶性肿瘤之一，在世界范围内其发病率居于恶性肿瘤第三位，随着生活水平的不断提高和饮食结构变化，中国大肠癌的发病率也逐年增高，特别是在大城市增幅则更快，如1984-2004的二十年间，上海地区大肠癌发病率男性已由16/10万增至23.61/10万，女性则由14.26/10万增至20.43/10万。目前影响大肠癌疗效的因素很多，缺乏预后及治疗敏感性监测的有效指标仍属急需解决的重要问题。

microRNA(miRNA)分子(微小核糖核酸)是近几年来分子生物学、遗传学和肿瘤学领域的研究热点。miRNA是一类新发现的非编码小RNA分子，通常在转录后水平调控基因表达。目前，针对miRNA调控肿瘤发生发展的研究已经成为在肿瘤研究领域内一个重要分支，国际上一些从事肿瘤发病机制以及治疗研究的著名实验室纷纷转向这一研究领域，一些杂志连续报道肿瘤相关miRNA潜在功能以及抗癌效应的研究。见下列报道：1.Weidhaas J.利用miRNA阐释肿瘤生物学.柳叶刀-肿瘤杂志.2010；11：106-7.2.Calin GA，Croce CM.miRNA作为人类肿瘤的标志.自然癌症综述2006；6：857-66.近年来大量研究表明，miRNA与多种肿瘤的进展存在着密切的关系，其既可作为抑癌基因，下调原癌基因的活性；也可作为癌基因，下调抑癌基因的活性，并具有高度的保守性、时序性和组织特异性。因此，miRNA在调节肿瘤细胞增殖、分化与凋亡，参与机体代谢以及肿瘤发生发展等过程中，发挥着非常重要的调节作用。从而决定了其在肿瘤患者临床预后与治疗监测中的独特优点。Borralho PM，Kren BT，Castro RE，et al.miRNA-143降低了人大肠癌细胞系HCT116的活力并增强了对5-氟尿嘧啶的敏感性.欧洲生物化学学会联盟杂志2009；276：6689-700.报道：在结肠癌细胞系HCT116中瞬时过表达miR-143(是微小RNA的一种)导致细胞活力减少约60％，而使用抗生素筛选的miR-143过表达细胞系暴露于5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil，5-FU)后，发现miR-143稳定表达的增加与细胞活力减少及细胞凋亡增加相关联。研究还证实以上改变与核碎裂及caspase-3，-8和-9(半胱天冬酶-3，-8，-9)活性的增加有关。另外，miR-143可导致细胞外调节蛋白激酶5，NF-κB和Bcl-2蛋白的表达下调，而当暴露于5-FU后其表达下调更加明显。这提示了miR-143可能作为抑癌基因参与调节细胞生长，细胞凋亡和某些化疗反应关键蛋白，并增加结肠癌细胞系对5-FU的敏感性。Chen X，Guo X，Zhang H，et al.Role of miR-143通过调控靶基因KRAS在大肠癌发生中的生物学作用.癌基因2009；28：1385-92.报道：发现在转染了miR-143的结肠癌细胞系Lovo中，KRAS(一种原癌基因)(miR-143的作用靶点)的表达显著降低，而转染miR-143特异性抑制剂则增加Lovo细胞系中KRAS蛋白的表达水平。使用miR-143抑制剂处理过的Lovo细胞系表现出更强的增殖能力。这说明miR-143可通过抑制KRAS的翻译来抑制CRC细胞系生长。但是，现有的这些研究仅仅是在基础层面筛选与大肠癌相关的miRNA，并利用离体细胞实验和在体动物实验，证实其潜在的生物学功能及分子作用机制，并未从临床大规模样本角度进行筛选分析具有潜在临床预后与治疗监测价值的大肠癌生物标志物，从而也未能找出有效的关键miRNA分子。本发明人利用miRNA芯片直接从大肠癌进展过程中的不同阶段(正常、腺瘤、腺癌)临床样本中进行筛选分析，找出了起关键作用的分子miR-150(是微小RNA的一种)，后期临床大规模样本分析，发现miR-150的表达水平与大肠癌有紧密联系。因此，对分子miR-150(中文)进行研究开发，有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于研究设计分子miR-150在制药中的应用。

本发明提供了分子miR-150在制备检测大肠癌药物中的应用。