[发明专利]用于检测血液中多西他赛浓度的试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测血液中多西他赛浓度的诊断试剂盒，包括试剂R1，以及结合有抗人多西他赛抗体的纳米微球试剂R2，还包括多西他赛标准品；

试剂R1，包括缓冲液20-200mmol/L，稳定剂2-20mmol/L，表面活性剂0.2-2mmol/L，无机盐10-500mmol/L，促进剂1-5mmol/L，防腐剂1-5mmol/L；

试剂R2，包括结合有抗多西他赛抗体的纳米微球0.1-10.0mg/ml，缓冲液20-200mmol/L，稳定剂2-20mmol/L，还包括防腐剂1-5mmol/L；

多西他赛标准品，包括缓冲液20-200mmol/L，稳定剂5-20mmol/L，防腐剂2-5mmol/L，0-100umol/L的多西他赛，其余为去离子水。

2.根据权利要求1所述的用于检测血液中多西他赛浓度的诊断试剂盒，其特征在于：所述的试剂R1中缓冲液为MES缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液或者甘氨酸缓冲液中的一种，缓冲液的PH值为6.0-8.0；

稳定剂为牛血清白蛋白、EDTA、EGTA、钼酸钠、钼酸铵、谷氨酸钠、或超氧化物歧化酶等中的一种或多种混合物；

无机盐为氯化钾、氯化钠等中的一种或多种混合物；

表面活性剂为吐温-20、吐温-40、吐温-60或Triton X-100中的一种；

促进剂为聚乙二醇6000、聚乙二醇8000等中的一种或多种混合物；

防腐剂为叠氮化钠。

3.根据权利要求1所述的用于检测血液中多西他赛浓度的诊断试剂盒，其特征在于：所述的试剂R2中，纳米微球的直径为50-200nm，纳米微球与紫多西他赛抗体的结合方式为化学交联法。

4.根据权利要求1所述的用于检测血液中多西他赛浓度的诊断试剂盒，其特征在于：所述的试剂R2中，缓冲液为Mes缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、或甘氨酸缓冲液中的一种，缓冲液的PH值为6.0-8.0；

稳定剂为牛血清白蛋白、EDTA、EGTA、钼酸钠、钼酸铵、谷氨酸钠、超氧化物歧化酶、氯化钾、氯化钠中的一种或多种混合物；

防腐剂为叠氮化钠。

5.根据权利要求1所述的用于检测血液中多西他赛浓度的诊断试剂盒，其特征在于：所述的多西他赛标准品中，缓冲液为三羟甲基氨基甲烷缓冲液、Mes缓冲液或甘氨酸缓冲液中的一种，缓冲液的PH值为6.0-8.0；

稳定剂为牛血清白蛋白、EDTA、EGTA、钼酸钠、钼酸铵、谷氨酸钠、超氧化物歧化酶、氯化钾、氯化钠中的一种或多种混合物；

防腐剂为叠氮钠。

6.根据权利要求3所述的用于检测血液中多西他赛浓度的诊断试剂盒，其特征在于：所述纳米微球与紫多西他赛抗体的结合方式为化学交联法，包括乳胶粒子的活化以及多西他赛抗体和纳米微球的结合，具体工艺步骤如下：

纳米微球的活化：

A)取40-100ug多西他赛抗体加入2400ul PH7.40的缓冲液，混匀备用；

B)取10-100mg直径为50-200nm乳胶粒子，离心4℃20000rpm 20min，弃去滤液；

C)加入2000ul浓度为10mM，PH值为7.40磷酸缓冲液，并用超声清洗剂溶解纳米微球，离心清洗三次；

D)加入PH值为7.40的缓冲液，超声，使纳米微球活化浓度为2.5mg/ml；加入10mg-50mg的N-羟基琥珀酰亚胺和6.0mg-30.0mg l-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；

E)室温振荡1h-3h；

F)4℃，20000rpm，20min，弃去滤液；

G)加入PH值为7.40的缓冲液，超声处理，用于结合；

多西他赛抗体和纳米微球的结合：

A)加入多西他赛抗体，使纳米微球结合浓度为2.5mg/ml；

B)室温振荡2-16h；

C)4℃高速离心30-90min，弃去上清液；

D)用3000ul，PH值为7.40的缓冲液，超声处理，稳定剂2-20mmol/L，保存溶液至2-8℃。