[发明专利]微乳液试剂盒的制备方法

说明书

[技术领域]

本发明涉及一种试剂，具体涉及一种稳定微乳液试剂盒制备的方法，可用于底物比色法测定血清脂肪酶试剂的配置。 

[背景技术]

血清脂肪酶作为一项胰腺功能检测的指标，其特异性很好，1，2-二月桂-rac-甘油基-3-戊二酸-6-甲基试卤灵酯底物比色法已在临床诊断中得到了认可，然而市场上采用的底物比色法的试剂开封稳定性差，开封的时间越长，结果越偏低，开封不到半个月质控就下降到范围之外，冷藏稳定性比较差，冷藏几个月后会有底物沉淀，另外批间差也比较大，因此在使用上给检验人员带来许多不便，结果的可信度也有所下降。 

[发明内容]

本发明为了克服现有技术的不足，提供了一种微乳液试剂盒的制备方法。 

为了实现上述目的，本发明设计了一种微乳液试剂盒的制备方法，包括试剂R1的制备，以及试剂R2的制备，具体步骤如下，其中：

试剂R1的制备： 

取TAPS缓冲液100mM/L；Colipase0.8mg/L；脱氧胆酸钠1.6mM/L；氯化钠0.5g/L；氯化钙4mM/L；牛黄脱氧胆酸1.5mM/L；叠氮钠0.1g/L；试剂R1的PH值为8.0； 

试剂R2的制备： 

A)取酒石酸缓冲液6mM/L；胆酸钠4mM/L；牛黄脱氧胆酸7mM/L；防腐剂0.1g/L；氯化钠0.5g/L；稳定剂，占试剂R2的0.1％-3％；试剂R2的PH值为3.5； 

B)取有机溶剂a，600μl，加入溴化十二烷基三甲基铵0.0086g，再加表 面活性剂b，0.0086g，将10mg底物加入溶解在此溶剂中； 

C)待步骤B中的溶液完全溶解后缓慢的加入到50ml步骤A中的溶液中，调节PH至3.5，并在一定温度下下搅拌26分钟，搅拌后用超声仪20千赫兹的功率超声8分钟，可得澄清透明的橘黄色试剂。 

所述试剂R2的制备中，有机溶剂a为乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或异丁醇中的一种。 

所述试剂R2的制备中，表面活性剂b为吐温系列、曲拉通系列、Brij系列、司盘系列、3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸或AEO系列中的一种。 

所述试剂R2的制备中，稳定剂为山梨糖醇、丝氨酸或牛血清白蛋白中的一种。 

所述试剂R2的制备中，搅拌温度最佳选择是在35-45℃之间。 

所述试剂R2的制备中，底物为1，2-二月桂-rac-甘油基-3-戊二酸-6-甲基试卤灵酯。 

所述试剂R2的制备中，酒石酸缓冲液的PH值为3.0-4.0。 

本发明同现有技术相比，改良的乳化方法后，在不影响试剂其他性能的基础上，改善了试剂的稳定性和批间差大的问题。 

[附图说明]

图1为本发明试剂盒线性的趋势图。 

图2为本发明试剂盒与免疫浊度法比较的相关性趋势图。 

图3为本发明试剂盒与底物比色法比较的相关性趋势图。 

[具体实施方式]

下面结合附图对本发明作进一步描述。 

实施例1： 

本发明的试剂盒，包括试剂R1的制备，以及试剂R2的制备，具体步骤如下，其中： 

试剂R1的制备： 

取TAPS缓冲液100mM/L；Colipase0.8mg/L；脱氧胆酸钠1.6mM/L；氯化钠0.5g/L；氯化钙4mM/L；牛黄脱氧胆酸1.5mM/L；叠氮钠0.1g/L；试剂R1的PH值为8.0。 

试剂R2的制备： 

A)取酒石酸缓冲液6mM/L；胆酸钠4mM/L；牛黄脱氧胆酸7mM/L；防腐剂0.1g/L；氯化钠0.5g/L；牛血清白蛋白，占试剂R2的0.1％-3％；试剂R2的PH值为3.5。 

B)取有机溶剂a正丁醇600μl，加入溴化十二烷基三甲基铵0.0086g，再加表面活性剂b，3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸0.0086g，将10mg底物1，2-二月桂-rac-甘油基-3-戊二酸-6-甲基试卤灵酯加入溶解在此溶剂中。 

C)待步骤B中的溶液完全溶解后缓慢的加入到50ml步骤A中的溶液中，调节PH至3.5，并在40℃下搅拌26分钟，搅拌后用超声仪20千赫兹的功率超声8分钟，可得澄清透明的橘黄色试剂。 

实施例2： 

将实施例1中的有机溶剂a换成异丁醇，其他配置步骤和实施例1相同。 

实施例3：