[发明专利]快速纯化及制备细菌PCR反应模板的方法无效
| 申请号： | 201210095106.5 | 申请日： | 2012-03-31 |
| 公开（公告）号： | CN102533739A | 公开（公告）日： | 2012-07-04 |
| 发明（设计）人： | 解宇 | 申请（专利权）人： | 杭州师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68;C12R1/19 |
| 代理公司： | 杭州裕阳专利事务所(普通合伙) 33221 | 代理人： | 应圣义 |
| 地址： | 310018 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 快速 纯化 制备 细菌 pcr 反应 模板 方法 | ||
【权利要求书】：
1.快速纯化及制备细菌PCR反应模板的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤a：牛粪便标本中添加PBS溶液5 mL，混匀，1000 r/min离心30 s，去除大颗粒的杂质；
步骤b：向含菌的牛粪稀释液中添加免疫BMPs 0.3 mg，混合均匀，反应30 min后进行磁性诱导，从牛粪中分离出磁性凝集物；
步骤c：分离出来的磁性凝集物使用PBS溶液分散清洗3次，清洗后，添加灭菌双蒸水100 μL，分散，重新振荡悬浮后至95℃加热5 min；再经12000 r/min离心5 min；
步骤d：回收上清液，制得PCR反应模板。
2.根据权利要求1所述的快速纯化及制备细菌PCR反应模板的方法，其特征在于：所述的PBS溶液的ph值为6.8。
3.根据权利要求1所述的快速纯化及制备细菌PCR反应模板的方法，其特征在于：所述的磁性诱导采用普通磁石进行诱导。
4.根据权利要求1所述的快速纯化及制备细菌PCR反应模板的方法，其特征在于：所述的牛粪便标本中的大肠杆菌O157浓度为1～104 cfu/g。
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