[发明专利]一种检测甲型副伤寒沙门菌的RT-LAMP试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测甲型副伤寒沙门菌(S.Paratyphi A)的靶序列，其具有SEQ ID NO.7所示的序列或其特异性片段。

2.用于扩增权利要求2所述靶序列的特异性引物组合。

3.如权利要求2所述的引物组合，其为特异性RT-LAMP引物组，包括以下6条引物：

F3：5’-CCTGTTAGAAGTGTTTACAACTT-3’；

B3：5’-GCTAAACCACCAAATTGTGT-3’；

FIP：5’-CCAATAGAAATCCTCGGCCAG-

CCGAGTTTTGATAAGGATGATTG-3’；

BIP：5’-AACCCTTCAAAACTACCAAGTCC-

GAATCTTTAACACGCAACTTTC-3’；

LF：5’-TGAGGTTGGATTCCAT-3’；

LB：5’-ATTGAGTGGGTTAACAAA-3’。

4.权利要求3所述的引物组合在制备甲型副伤寒沙门菌的检测试剂盒或检测试剂中的应用。

5.一种含有权利要求3所述引物组合的检测试剂。

6.一种含有权利要求3所述引物组合的甲型副伤寒沙门菌的RT-LAMP检测试剂盒。

7.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，还包含RT-LAMP反应液，与RT-LAMP引物共同构成LAMP检测体系；25μL RT-LAMP检测体系的具体配置为：10μM的F3、B3各0.25μL；10μM的FIP、BIP各2μL；10μM的LF、LB各1μL；2×反应混合buffer12.5μL，其含40mM Tris-HCl，pH 8.8，20mM KCl，16mM MgSO₄，20mM(NH₄)₂SO₄，0.2％Tween20，1.6M甜菜碱和2.8mM dNTPs，1μl的BstDNA聚合酶和AMV逆转录酶混合物，5μL的模板RNA。

8.一种检测甲型副伤寒沙门菌(S.Paratyphi A)的方法，其特征在于，用权利要求3所述的引物组进行RT-LAMP反应，将比浊度≥0.1的扩增结果判定为RT-LAMP反应阳性。

9.如权利要求8所述的检测方法，其特征在于，RT-LAMP反应条件为：65℃恒温1h。