[发明专利]拜氏梭菌及其以木糖渣为原料发酵制备生物丁醇的方法有效
申请号: | 201210089406.2 | 申请日: | 2012-03-30 |
公开(公告)号: | CN102719371A | 公开(公告)日: | 2012-10-10 |
发明(设计)人: | 李福利;张婉璐;刘自勇 | 申请(专利权)人: | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P7/16;C12R1/145 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 周长兴 |
地址: | 266101 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 拜氏梭菌 及其 木糖渣 原料 发酵 制备 生物 丁醇 方法 | ||
1.一株拜氏梭菌,其分类命名为拜氏梭菌Clostridium beijerinckii Y-3,其保藏登记号为:CGMCC 5805,保藏单位:中国普通微生物菌种保藏管理中心。
2.权利要求1所述的拜氏梭菌在生产丁醇中的应用。
3.一种利用拜氏梭菌Y-3以木糖渣为原料发酵制备生物丁醇的方法,包括如下步骤:
1)利用氢氧化钙脱毒工艺对木糖渣的固液混合物进行预处理;
2)步骤1)预处理得到的木糖渣残渣中加入纤维素酶进行酶解,得到含多组份糖的酶解液;
3)在酶解液中加入氮源,调节pH至6-8,制成木糖渣水解液发酵培养基;
4)将拜氏梭菌Y-3接种至步骤3)制成的木糖渣水解液发酵培养基中,厌氧条件下发酵制备生物丁醇。
4.如权利要求3所述的方法,其中,步骤1)的木糖渣为玉米芯酸水解后的残渣。
5.如权利要求3所述的方法,其中,步骤1)的氢氧化钙脱毒工艺中氢氧化钙为0.4-0.6M的氢氧化钙溶液,木糖渣的固液混合物中的料液比为8-12%w/v,用氢氧化钙溶液调节木糖渣的固液混合物的pH至10-11,之后加入亚硫酸钠。
6.如权利要求3所述的方法,其中,步骤2)加入纤维素酶之前,先将经氢氧化钙脱毒工艺处理的木糖渣残渣和pH为4-5,浓度为0.1-0.2M的醋酸钠-醋酸缓冲液按固液比8-10%w/v混合,经过脱氧处理后高压灭菌。
7.如权利要求3所述的方法,其中,步骤2)所述纤维素酶为纤维素酶复合物和β-葡萄糖苷酶;酶解的pH值为4-5。
8.如权利要求3所述的方法,其中,步骤3)中的木糖渣水解液发酵培养基为pH 6-8的含有碳源、氮源及无机盐的固液培养基;其中的碳源为酶解液中的多组分糖;氮源为麸皮、玉米粉、豆粕、米糠、花生饼、牛肉膏、酵母膏、蛋白胨、硝酸盐或铵盐中的一种以上混合物。
9.如权利要求3所述的方法,其中,步骤4中发酵温度为33-37℃。
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