[发明专利]一种检测农药残留的免疫传感器的制备方法

说明书

技术领域

本发明提供一种检测农药残留的电流型免疫传感器的制备方法，属于生物传感器技术领域。

背景技术

我国是一个农业大国，农业对国民经济以及人民生活有着举足轻重的作用，在现代农业生产中农药是防治病虫害，保障农业丰收，确保粮食供应的重要生产资料。农药的大量使用，在提高农作物产量的同时，其农药残留超标的负面影响也逐渐显现出来所谓的农药残留是指农药使用后残存于生物体、农副产品和环境中的微量农药原体、有毒代谢物、降解物和杂质的总称。一般不易挥发和在植物体内、土壤中不易分解，且脂溶性强的农药施用后残留量更高。克百威农药是氨基甲酸酯类农药的一种，别名呋喃丹或虫螨威，也叫大扶农，化学名2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基甲氨基甲酸酯，是一种高效广谱的杀虫剂和杀螨剂，过量使用会对动物有致畸、致突变、致癌作用。随着我国人民生活水平不断提高，农产品的质量安全问题越来越受到关注，尤其蔬菜中农药残留问题已经成为公众关注的焦点，全国每年都有上百起因食用被农药污染的农产品而引起的急性中毒事件，严重影响广大消费者的身体健康，因此由农药残留超标导致的食品安全问题，已越来越受到各国政府和公众的重视。

关于农药残留检测的方法和技术有多种，无论是传统方法和近代快速检测方法都存在一定的缺陷。传统的农药残留的检测方法如气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)、色谱/质谱联用技术(GC/LC-MS)、毛细管电泳法(CE)虽然具有高选择性和精确度，但仍存在着样品前处理复杂、仪器设备昂贵、操作麻烦、检测时间长、不适合现场检测等不足，因此不适用于农产品快速检测的要求。目前为了保障人们的食品安全，很多农产品批发市场、宾馆、饭店等场所都应用检测设备检测农产品的农药残留情况。目前，我国农药残留的速测方法是酶抑制试纸法和酶抑制分光光度法（农残快速检测仪），可以实现有机磷农药及氨基甲酸酯类农药的现场快速检测，具有较好的实用价值。速测卡是通过肉眼观察卡片的颜色变化，因此一般只能用于严重超标的蔬菜样品进行定性测量。酶抑制分光光度法的应用也比较广泛，国内已有多种农药残留速测仪均是基于此原理。分光光法的原理是基于吸光度的变化进行检测的，但蔬菜水果中大量的色素会对分光光度法造成很大的影响，导致检测结果的不准确。但是上述方法存在回收率低、错检、漏检比例较高、重复性差、难以满足低残留和定量检测的要求等缺点。

发明的目的在于提供一种能克服上述缺陷、操作简单、灵敏度高，选择性好的检测农药残留的电流型免疫传感器的制备方法。

其技术方案为：一种检测农药残留的免疫传感器的制备方法，其特征在于：电流型免疫传感器的组状过程为电沉积纳米金，在饱和硫脲溶液中浸泡，沉积第二层纳米金，自组装克百威单克隆抗体，自组装BSA封闭。

所述的一种检测农药残留的免疫传感器的制备方法，其特征在于：玻碳电极（d=3mm）的清洗，免疫传感器敏感界面的构建及过程表征，免疫传感器工作曲线的建立，免疫传感器性能的检测，免疫传感器对实际样品的检测。

所述的一种检测农药残留的免疫传感器的制备方法，其特征在于：所制备的电流型免疫传感器的工作曲线为：在1.0 ng/mL 到100.0ng/mL范围内为 y=0.0649x+0.0489，在100.0ng/mL 到 200μg/mL范围内为y=0.0532x+0.0767，免疫传感器的性能受免疫扩散控制。免疫传感器性能检测包括选择性、稳定性和再生能力，免疫传感器对蔬菜样品回收率的测定。