[发明专利]一种合成多肽及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物制药领域，具体涉及一种合成多肽及其应用。

背景技术

对阿尔茨海默病(AD)、帕金森病(PD)、肌萎缩侧索硬化症(ALS)和亨廷顿病(HD)等神经退行性疾病特定的遗传和环境因素的研究表明，自由基增多、脂质过氧化、钙稳态失调、细胞色素C释放，是氧化应激增强的主要原因，最终导致神经元凋亡／死亡的发生。

氧化应激是由于体内的氧化还原平衡失调，产生了过多的活性氧物质，如过氧化氢(H₂O₂)、一氧化氮(NO)、超氧阴离子(O₂^-)及高活性羟自由基(HO·) 等，而使机体面临潜在的损伤。

以最常见的神经退行性疾病阿兹海默症为例，目前，全球约有2000-3000万阿兹海默症患者。欧美国家的统计数据显示，65岁以上老年人的痴呆患病率为3.0%-5.0%，我国国内的阿兹海默症病例数已达10万。

阿兹海默症的表现与脑损伤的部位有关，其恶化是一个缓慢的过程，典型症状为：记忆力、定向力、抽象思维等障碍及人格改变，同时伴有智力衰退和社会活动自主能力减退。阿兹海默症重要病理学特征是脑组织内存在两种蛋白聚集物：β-淀粉样蛋白（Aβ）沉积形成的老年斑和Tau蛋白形成的神经纤维缠结（NFTS）。Aβ前体蛋白APP经β或γ分泌酶作用产生Aβ-40／42／43，易聚积沉积，其中Aβ-42是老年斑的主要成分，具有特异性神经毒性作用，Aβ诱导细胞膜上的脂质和蛋白质氧化修饰，致使R0S生成增多，改变了膜的通透性，Ca²⁺内流增加，激活Ca²⁺依赖性蛋白激酶、脂酶，使胞质自由基合成增多，损伤细胞器。此外，Aβ可下调细胞周期蛋白激酶Cdk5和糖原合成激酶GSK3beta活性，影响着Tau蛋白磷酸化作用，致使自由基生成增多。

多巴胺能神经元内氧化应激的加重和线粒体功能障碍是导致帕金森病的中心环节，帕金森患者同时还存在线粒体复合体I的缺陷，这可能是细胞氧化应激加重的原因或结果。研究表明肌萎缩侧索硬化症(ALS)发病主要是由于NMDA受体或AMPA受体激活导致的，线粒体超载Ca²⁺和ROS生成对其具有推动作用。

因此，神经退行性疾病的发病机制提示完善的自由基清除体系可能对防止此类疾病的发生起重要作用，从而为抗自由基治疗提供了客观的分子生物学理论基础。

目前，维生素E及谷胱甘肽的抗氧化作用在阿兹海默症及帕金森病的临床实验得到证实，昭示了其它的抗氧化剂在神经退行性疾病的预防治疗过程中的应用具有一定的前景。

自1960年，Marcuse首先发现抗氧化肽以来，因其不仅具有良好的抗氧化功效，同时兼具营养性的特点，对于抗氧化肽的研究逐年增多。经蛋白酶解后分离纯化的手段分离得到高抗氧化活性肽的方法成本高，分离时间长，品质难以控制，产量低制约了抗氧化肽的大规模生产及应用。由此催生了化学合成制备抗氧化肽的方法。化学合成多肽现阶段多采用固相合成法，目前固相合成法的技术较为成熟，可广泛应用于多肽的合成。化学法合成的具有强抗氧化性质的多肽作为药物，具备以下的优势：分子量小，易于人工合成，成本低，特异性强，副作用低，无免疫原性，比较安全可靠；并且人工合成多肽纯度高，不存在热原性问题，应用于神经退行性疾病的治疗具有非常广阔的应用前景。谷胱甘肽可应用于帕金森疾病的早期治疗，具有较为显著的疗效。同时谷胱甘肽在新生儿缺氧缺血性脑病的治疗过程中发挥了重要的作用提升了患儿治愈率，成为治疗新生儿缺氧缺血性脑病的有效药物。

实验所采用的神经细胞氧化损伤模型为PC12细胞，为大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤克隆化的细胞株，起源于神经嵴，在细胞形态、结构和功能上与神经元极其相似，与原代培养的神经细胞有高度一致性，并具有易于稳定培养的优点，具有典型的神经内分泌细胞特性，在细胞培养过程中易获得，一致性好，因此被国内外广泛用作研究神经退行性疾病的细胞模型。过氧化氢能产生大量氧自由基引起氧化应激反应,是一常用的细胞氧化应激诱导剂,广泛用于诱导产生神经退行性疾病的细胞模型。

发明内容

本发明的目的是提供了一种具有保护PC12细胞氧化损伤的合成多肽，可应用于过氧化氢损伤的神经细胞进行保护，使得细胞存活率提高。

本发明所述的合成多肽的序列为： Glu-Cys-His 

其中，Glu表示英文名称为Glutamic acid，中文名称为谷氨酸的氨基酸的相应残基；