[发明专利]柔嫩艾美耳球虫eIF3d基因及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，尤其涉及一种柔嫩艾美耳球虫真核翻译起始因子3d基因(eukaryotic translation initiation factor3d，eIF3d)及其应用。

背景技术

鸡球虫病是规模化养鸡场最容易发生的寄生虫病，它的病原体为艾美耳属鸡球虫。鸡球虫病能够导致禽类的生长缓慢和饲料转化率降低，间接地引起养殖经济损失，如果严重时，则直接导致鸡只大量死亡，从而造成养殖户的重大经济损失。目前，有报道表明，每年因鸡球虫病，就给全世界的养殖业造成了约5亿英镑的巨大损失。当前在禽类的养殖业中主要还是依靠药物来预防控制鸡球虫病，但是球虫抗药性的问题日益突出。同时鸡体药物残留和药物价格过高等问题也促使人们去寻找新的方法来防治鸡球虫病。现阶段，一些研究工作者通过寻找与鸡球虫发育、入侵相关的基因，研制基因工程疫苗成为防治鸡球虫病的新思路，也成为现阶段鸡球虫研究的热点。而寻找到合适的理想球虫抗原，就成为了研制基因工程疫苗的突破点和难点。

柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)是一种致病性和危害性最大的鸡球虫，它主要寄生于盲肠及其附近区域，能够引起出血性肠炎，对雏鸡危害最大，严重时能引起较高的死亡率。

真核翻译起始因子又称为真核起始因子，是指和真核翻译起始相关的一些蛋白质。目前已被鉴定的真核翻译起始因子共有12种。真核生物的翻译起始就是通过这些真核翻译起始因子之间或者不同的真核翻译起始因子与核糖体、mRNA以及起始tRNA之间的相互作用来完成。真核翻译起始因子中最大的起始因子是真核翻译起始因子3(eIF3)复合物，eIF3在真核翻译起始进程中起着核心作用。

不过，到目前为止还没有柔嫩艾美耳球虫eIF3d基因的研究报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种柔嫩艾美耳球虫eIF3d基因，该EteIF3d基因编码的重组蛋白对鸡球虫具有良好的免疫保护效果，适于开发成防治鸡球虫病的新疫苗。

此外，还需要提供一种柔嫩艾美耳球虫eIF3d基因的应用。

为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现：

在本发明的一个方面，提供了一种柔嫩艾美耳球虫基因，所述基因为编码SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的柔嫩艾美耳球虫eIF3d基因。

优选的，所述基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示的DNA序列。

在本发明的另一方面，提供了一种柔嫩艾美耳球虫蛋白质，所述蛋白质为柔嫩艾美耳球虫eIF3d蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

在本发明的另一方面，还提供了一种包含上述柔嫩艾美耳球虫基因的重组载体。

所述重组载体包括重组克隆载体或重组表达载体，重组表达载体包括重组原核表达载体、重组真核表达载体。

在本发明的另一方面，还提供了一种宿主细胞，包含上述重组载体，或已用上述基因转化或转染。

在本发明的另一方面，还提供了一种抗血清，该抗血清是用上述重组载体表达的重组蛋白免疫动物而制得。

在本发明的另一方面，还提供了一种抗体IgG，该抗体IgG是由上述抗血清经纯化而制得。

在本发明的另一方面，还提供了一种上述柔嫩艾美耳球虫基因在制备预防或治疗鸡球虫病的疫苗或药物中的应用。

所述疫苗或药物通过抑制柔嫩艾美耳球虫子孢子入侵宿主细胞而阻断球虫生活史来发挥作用。

在本发明的另一方面，还提供了一种上述柔嫩艾美耳球虫蛋白质在制备预防或治疗鸡球虫病的疫苗或药物中的应用。

所述疫苗或药物通过抑制柔嫩艾美耳球虫子孢子入侵宿主细胞而阻断球虫生活史来发挥作用。

在本发明的另一方面，还提供了一种上述柔嫩艾美耳球虫基因在筛选预防或治疗鸡球虫病的药物中的应用。

本发明柔嫩艾美耳球虫eIF3d基因，与子孢子入侵宿主细胞相关，Western-blot分析表明本发明EteIF3d的重组表达蛋白具有良好的抗原性；免疫保护性试验结果显示EteIF3d重组蛋白免疫组在增重、卵囊减少率、病变记分等方面都强于感染对照组，对鸡体内抗体水平进行检测，结果EteIF3d重组蛋白免疫后的鸡，在整个免疫期及感染期均有较高抗体存在于鸡体内。因此，本发明的EteIF3d基因，为开发防治鸡球虫病的新疫苗提供了新的候选抗原，适于开发成防治鸡球虫病的新基因工程疫苗。

附图说明

下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。