[发明专利]一种分子标记辅助回交提高小麦抗赤霉病扩展的方法

权利要求书

1.一种分子标记辅助回交提高小麦抗赤霉病扩展的方法，其特征是包括以下步骤：

1)以携带抗扩展QTL的重组自交家系为供体，以综合性状优良但感赤霉病的小麦品系为受体，进行常规有性杂交，所得的杂种F₁代再与轮回亲本回交，得到回交一代BC₁F₁分离群体，种植于田间；

2)在苗期提取BC₁F₁分离群体中各单株的DNA，并利用与目标QTL紧密连锁的SSR标记进行PCR检测，选择含有目标等位基因的杂合型单株继续与轮回亲本杂交获得BC₂F₁分离群体；

3)在苗期提取BC₂F₁分离群体中各单株的DNA，继续利用与目标QTL紧密连锁的SSR标记进行PCR检测，筛选含有目标QTL的杂合型单株；再选择分布于整个小麦基因组的150对SSR标记用于对含有目标QTL的单株进行背景回复率分析，选择背景回复率最高的单株继续回交获得BC₃F₁分离群体；

4)重复步骤3)，获得携带目标QTL且背景回复率最高的BC₃F₁目标单株后自交获得BC₃F₂分离群体，种植于田间；

5)在苗期提取BC₃F₂分离群体中各单株的DNA，重复步骤3)，选择携带目标QTL且背景回复率最高的纯合型单株自交，获得BC₃F₃纯合家系。

2.根据权利要求1所述的分子标记辅助回交提高小麦抗赤霉病扩展的方法，其特征是所述PCR检测的方法包括以下步骤：

1)用SDS法提取各世代群体中单株的DNA。

2)利用与目标QTL Qfhs.nau-3B紧密连锁的两侧SSR标记ZMB67和HBE383对上述基因组DNA进行PCR扩增。

3)对PCR扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，分析带型。在供体亲本中ZMB67的扩增条带为110bp，HBE383的扩增条带为245bp。凡呈现有与供体亲本相同大小的DNA条带的单株即为目标单株。

3.根据权利要求1所述的分子标记辅助回交提高小麦抗赤霉病扩展的方法，其特征是利用随机选择的SSR标记进行背景选择包括以下步骤：

1)根据小麦遗传图谱选择分布于21条染色体的150对SSR标记用于目标单株的PCR扩增；

2)对PCR扩增产物进行凝胶电泳，分析带型，计算背景回复率；携带有最多的与受体亲本完全一致带型的单株即为目标单株，用于下一代回交或自交。

4.根据权利要求1所述的分子标记辅助回交提高小麦抗赤霉病扩展的方法，其特征是所述的供体为从南大2419×望水白重组自交系群体中选出的携带抗扩展QTL Qfhs.nau-3B的家系SSD129；所述的受体为绵阳99-323，所述的轮回亲本为绵阳99-323。