[发明专利]一种黑种草子总黄酮提取物及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种黑种草子总黄酮提取物及其制备方法和用途，属于中药技术领域。

背景技术

黑种草子为毛茛科黑种草属一年生草本植物黑种草Nigella damascena L.或家黑种草即果种草Nigella sativa L.或瘤果黑种草即腺毛黑种草Nigella glandulifera Freyn et Sint.的种子。夏、秋二季果实成熟时采割植株，晒干，打下种子，除去杂质，晒干。黑种草子具有利尿、补肾脑、活血、解毒、下乳通经、止咳和乌发抗衰老等功效，其性味甘、辛、温，作为维吾尔族习用药收入各版《中国药典》，用于胸闷气促、乳肿、耳鸣和乳汁减少等病症的治疗。近年来药理研究表明黑种草子具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤、降血脂、降血糖、保肝等生物活性。化学成分的研究表明，黑种草子含有大量具有显著生物活性的不饱和脂肪酸和挥发油、黄酮、皂苷和生物碱等化合物。目前未见对其总黄酮的制备工艺及抗癌、抗血小板聚集、抗炎药效进行研究的文献报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种黑种草子总黄酮提取物及其制备方法和用途。

本发明所述的一种黑种草子总黄酮提取物，是以黑种草子为原料提取得到，呈棕黄色至棕褐色，且总黄酮在提取物中所占的质量百分比为50％～90％。

一种所述的黑种草子总黄酮提取物的制备方法，包括如下步骤：将黑种草子粉碎后，用水、醇或醇-水溶液提取，浓缩提取液至浸膏；用醚溶剂脱脂，用有机溶剂萃取至萃取层无色，收集萃取相；上大孔树脂柱吸附，先用水洗脱，再用醇-水溶液洗脱，收集醇-水洗脱液，浓缩、干燥，即得所述的黑种草子总黄酮提取物。

作为进一步优选方案，所述的醇为无水乙醇或无水甲醇；所述的醇-水溶液是体积百分比为10～95％的乙醇-水溶液。

作为进一步优选方案，提取温度为60～100℃，每次提取所用水、醇或醇-水溶液的质量是黑种草子质量的8～10倍；每次提取时间为1～3小时；共提取2～5次。

作为进一步优选方案，用于脱脂的醚溶剂为石油醚或乙醚。

作为进一步优选方案，用于萃取的有机溶剂为乙酸乙酯、二氯甲烷或氯仿。

作为进一步优选方案，所述的大孔树脂柱选用弱极性大孔树脂，例如：AB-8大孔树脂、D101大孔树脂、HPD-600大孔树脂等。

作为进一步优选方案，用于洗脱的醇-水溶液是体积百分比为10～95％的乙醇-水溶液；收集的醇-水洗脱液是体积百分比为60～95％的乙醇-水洗脱液。

本发明所述的黑种草子总黄酮提取物的一种用途是用于制备抗恶性肿瘤药物，所述的恶性肿瘤尤其包括脑胶质瘤、胰腺癌、非小细胞肺癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、黑色素瘤及肝癌。

本发明所述的黑种草子总黄酮提取物的另一种用途是用于制备抗血小板聚集的药物。

本发明所述的黑种草子总黄酮提取物的又一种用途是用于制备抗炎药物。

本发明提供的黑种草子总黄酮提取物中所含的总黄酮的质量百分比可达50％～90％；体外药效学试验证明：所制备的黑种草子总黄酮提取物具有抗恶性肿瘤、抗血小板聚集及抗炎活性，所述的恶性肿瘤尤其包括脑胶质瘤、胰腺癌、非小细胞肺癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、黑色素瘤和肝癌，有望开发成抗恶性肿瘤药物、抗血小板聚集的药物及抗炎药物，具有显著药用效果；另外，本发明的黑种草子总黄酮提取物的制备方法简单，可操作性强，适合工业化生产要求。

附图说明

图1-1为不同实验组对U87人脑胶质瘤细胞株增殖能力的影响图；

图1-2为不同实验组对U87人脑胶质瘤细胞克隆形成的影响图；

图2为不同实验组对PANC-1人胰腺癌细胞株增殖能力的影响图；

图3为不同实验组对BXPC-3人胰腺癌细胞株增殖能力的影响图；

图4-1为不同实验组在给药处理24h后对A549人非小细胞肺癌细胞株增殖能力的影响图；

图4-2为不同实验组在给药处理72h后对A549人非小细胞肺癌细胞株增殖能力的影响图；

图5为不同实验组对NCI-H2126人肺癌细胞株增殖能力的影响图；

图6-1为不同实验组在给药处理24h后对AGs人胃癌细胞株增殖能力的影响图；

图6-2为不同实验组在给药处理72h后对AGs人胃癌细胞株增殖能力的影响图；

图7为不同实验组对MCF-7人乳腺癌细胞株增殖能力的影响图；

图8为不同实验组对MDA-MB-231人乳腺癌细胞株增殖能力的影响图；