[发明专利]一种转基因花生组培苗壮苗、生根的方法

说明书

 

技术领域

本发明涉及一种花生培苗方法，尤其是一种转基因花生组培苗壮苗、生根的方法。

 

背景技术

利用组织培养方法进行花生扩繁具有以下优势：首先，可短时间大量繁殖，对繁育稀缺品种以及目前的花生转基因工作具有十分重要的意义；其次，占用空间小，不受地区、季节限制；另外，培养条件人为可控，条件均一，便于稳定地进行培养生产。

生根环节是整个花生组培过程的关键一环，承接了前期的诱导分化环节与后期的移栽环节。组培苗生根的优劣直接决定了后期移栽的成活率。而生根的好坏又直接受前期分化苗质量的影响，若苗短小、细弱，生根质量也差。因此必须经过壮苗。壮苗与增殖系数的提高相互制约，若单纯追求增殖系数，分化苗势必短小、细弱，若单纯追求苗的质量，又影响增殖系数，使分化苗减少。必须通过选择适宜的细胞分裂素和生长素的种类及不同浓度配比，以实现增殖和壮苗的双重目的。目前就花生组培来说，还没有一套行之有效的壮苗、生根方法，现有方法无法同步实现增殖与壮苗的目的，且生根率低，生根质量差，严重影响后期移栽的成活率。因此，建立一套高效的壮苗、生根体系是目前条件下提高花生组织培养效率的关键。

 

发明内容

本发明提供了一种壮苗效果好、生根率高、生根质量好的转基因花生组培苗壮苗、生根的方法。

实现本发明目的的转基因花生组培苗壮苗、生根的方法，包括如下步骤：

（1）将已经诱导分化出丛生芽的花生组培苗转移到壮苗培养基A上20天，10天更换一次培养基，所述壮苗培养基A的组分为MS培养基，所用激素为细胞分裂素6-BA；

（2）将长至1.5cm以上的组培苗分成单株，移至壮苗培养基B上20~25天，10天更换一次培养基，所述壮苗培养基B的成分为MS培养基，所用激素为0.4 mg/L的细胞分裂素6-BA和0.1mg/L的生长素NAA；

（3）待苗长至2.5~4cm，移至生根培养基生根，所述生根培养基的成分为1/2 MS培养基，所用激素为生长素IBA和NAA，浓度分别为3mg/L和0.3mg/L。

本发明进一步提供了上述花生组培苗壮苗、生根方法的优选技术方案：

作为优选，所述步骤（1）中的培养基A的工作浓度从恢复培养基和诱导培养基的3mg/L降至1mg/L，培养基厚度为1.5cm。

作为优选，所述将已经诱导分化出丛生芽的花生组培苗转移到壮苗培养基A上时，将生长较好的芽用无菌手术刀分成单株，并切除底部与培养基接触形成的黑褐色部分，底部茎端没入培养基2-3mm培养，将一些尚未成型的芽分成几个芽丛培养。

作为优选，所述步骤（2）中的培养基B的厚度为1.5cm。

作为优选，所述选取长至1.5cm以上的组培苗单株移至壮苗培养基B上，切除底部与培养基接触形成的黑褐色部分，底部茎端没入培养基2-3mm培养。

作为优选，所述步骤（3）中的生根培养基的厚度为2~2.5cm。

作为优选，所述将经过壮苗长至2.5~4cm高的组培苗移至生根培养基上15~30天，待生出3条以上的根，根长超过2cm，肉质茎超过两个节间，即可进行炼苗、移栽。

作为优选，所述步骤（3）的生根培养到15天后，若生根情况仍达不到要求，需要在原培养基上层再倒0.6~1cm厚生根培养基，新加培养基需用水浴凉至34~36℃，将组培瓶倾斜沿瓶壁缓缓倒入。

作为优选，所述步骤（1）和步骤（2）所用光照强度均为4000Lx，生根阶段光照强度调整到5000Lx。

本发明的转基因花生组培苗壮苗、生根的方法的有益效果如下：

本发明的花生组培苗壮苗、生根的方法，获得的花生组培苗长势旺盛，生根率达到100%，且不定根粗壮、毛细根发达，有效提高了移栽成活率。解决了花生组培苗生根难、生根差的问题，社会效益和科研价值显著。

 

具体实施方式

实施例1