[发明专利]pH敏感普鲁兰多糖衍生物纳米药物载体和载药粒子及制备方法

权利要求书

1.一种pH敏感普鲁兰多糖衍生物纳米药物载体材料，其特征在于它是以分子中具有咪唑基改性基团和普鲁兰多糖、羧甲基普鲁兰多糖及普鲁兰多糖琥珀酸酯为原料合成，其中改性基团与普鲁兰多糖中葡萄糖单元的摩尔比为1∶10～1∶4；合成方法：将具有pH响应特性的咪唑基团改性分子通过化学键接枝于普鲁兰多糖的多糖骨架，合成pH敏感普鲁兰多糖衍生物。

2.根据权利要求1所述的纳米药物载体材料，其特征在于所述的咪唑基改性基团为：尿刊酸、聚L-组氨酸、1H-咪唑-4甲酸、2-甲基咪唑-4-甲酸及苯并咪唑-4-甲酸；所述的咪唑基改性基团的取代度为2～10％，响应pH为6.0～7.0。

3.一种权利要求1所述的pH敏感普鲁兰多糖衍生物纳米药物载体材料的合成方法，其特征在于包括的步骤：

1)按计量将改性基团分子、N，N′-二环己基碳二亚胺(DCC)与4-二甲基氨基吡啶(DMAP)溶于二甲基亚砜(DMSO)溶液，室温下搅拌反应1～2h，生成活性酯形式；

2)普鲁兰多糖、O-羧甲基普鲁兰多糖或普鲁兰多糖琥珀酸酯溶解于DMSO中，搅拌下将1)中反应液加至多糖溶液中，继续搅拌反应24～48h；

3)过滤除去反应液中生成的白色沉淀，然后将滤液滴加至过量无水乙醇中进行醇沉处理，收集沉淀，干燥，即得白色粉末状改性普鲁兰多糖；

4)透析法：将改性普鲁兰多糖溶解于DMSO溶液并转移至透析袋中，于生理盐水或去离子水中透析24h，前12h每1～2h更换透析液，后12h每3～4h更换透析液至溶液中DMSO全部除尽，而后从透析袋中取出，探头超声处理约5min，输出功率20W，间歇脉冲工作方式：脉冲宽度为2s，间歇时间为2s，即得纳米悬液；或

乳化扩散法：将改性普鲁兰多糖溶解于DMSO溶液中，电磁搅拌下用注射器持续缓慢注入0.5％聚乙烯醇(PVA)溶液中，形成纳米悬液，将纳米悬液离心处理，用去离子水反复洗涤、离心，除去表面PVA，然后加入去离子水吹打分散制成纳米悬液。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述DCC、DMAP与改性分子的摩尔比为1.0～1.2∶1。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述的普鲁兰多糖的分子量范围5×10⁴～2×10⁵Da；所述O-羧甲基普鲁兰多糖分子中羧甲基取代度为50～70％；所述普鲁兰多糖琥珀酸酯分子中琥珀酰基取代度为25～50％。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述改性普鲁兰多糖的浓度为0.5～5％(g/100mL)；所述的透析袋的截留分子量12～14kDa。

7.一种权利要求1所述的pH敏感普鲁兰多糖衍生物纳米药物体系，其特征在于它是以pH敏感普鲁兰多糖衍生物纳米材料为药物载体，负载有CA-4、CA-4磷酸酯、MDR抑制剂维拉帕米、阿霉素、表阿霉素、紫杉醇、10-羟基喜树碱、米托蒽醌、长春新碱中的至少一种，其质量比为3～10∶1。

8.权利要求7所述的pH敏感普鲁兰多糖衍生物纳米药物体系合成方法，其特征在于它包括的步骤：

取碳二亚胺活化剂，DMAP和化疗药物溶解于无水DMSO中，室温下避光搅拌12h，备用；取pH敏感普鲁兰多糖衍生物纳米材料溶解于无水DMSO中，然后滴加至上述反应液中，室温下继续避光搅拌反应48h，醇沉处理，反复洗涤，干燥；

所述水溶性碳二亚胺、DMAP与药物的摩尔比为1∶1.0～1∶1.2；

所述化疗药物与多糖分子中糖单元的摩尔比为1∶1～1∶3；

所述醇沉处理步骤采用20倍量反应液的乙醇溶液；

所述的碳二亚胺活化剂为：1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)及其盐酸盐、或N，N’-二异丙基碳二亚胺(DIC)及其盐酸盐、碘化[1-环己基-3-(3-三甲氨丙基)碳二亚胺]。